乙酰丙酮法测定食品中甲醛的含量
乙酰丙酮法测定食品中甲醛的含量
本方法的基本原理是样品中的甲醛在ph为5.5—7.0条件下，与乙酰丙酮及铵离子，生成黄色的3、5—乙酰基—1、4二氢吡啶二碳酸，在412nm波长下有zui大吸收，用标准曲线法定量
1、检测设备和试剂
1.1检测设备：uv-754分光度计（上海第三分析仪器厂制造）
1.2试剂
1.2.1乙酰丙酮溶液：吸取3.0ml乙酰丙酮（ar）用水稀释至200ml。
1.2.2乙酸乙酸铵缓冲溶液：称取15.42g乙酸铵（ar）溶于300ml水中，加入2.3ml冰醋酸，调ph值近5.75，用水稀释至400ml。
1.2.3硫酸钠溶液：称取20g*（ar）溶于250ml烧杯中，加入100ml水溶解。
1.2.4乙酸锌溶液:称取20g乙酸锌（ar）加水溶解并稀释至200ml。
1.2.5氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠（ar）于500ml烧杯中,加水溶解并稀释至500ml。
1.2.6甲醛标准溶液：10.0mg/ml（由国家标准物质研究中心购进）
1.2.7甲醛标准使用液：由甲醛标准溶液稀释成10ug/ml甲醛标准使用液。
2、检测环境条件：常规室温
3、标准曲线的制作—
分别吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80ml甲醛标准使用液（相当甲醛含量为:0.00,2.0,4.0
,6.0,8.0ug甲醛）于10ml比色管中，加入2ml乙酸—乙酸铵缓冲溶液和1ml乙酰丙酮溶液，加水至刻度，混匀，置70℃水浴中放置30min，取出冷却至室温后，用1cm比色杯，于412nm处以零号管调节零点，测定吸光度，以吸光度及甲醛的含量为纵、横坐标，绘制标准曲线。
4、样品处理
称取面制品样品5.00g于50ml具塞比色中,加入35ml硫酸钠溶液,加塞,混匀,置60℃水浴中放置一小时,并不断振摇,取出,冷却后,加入5ml乙酸锌溶液和3ml氢氧化钠溶液,用水定容至50ml,混匀,放置20min,3000r/min,离心,取上清液过滤,备用,同时做空白试验。
5、样品测定:
吸取上述样品处理液5.0ml于10ml比色管中,依自“加入2ml乙酸—乙酸铵缓冲溶液……”起同法操作，同时作空白，为参比液，根据测得的吸光度，从标准曲线上查出被测液中甲醛含量，从而计算出样品中甲醛的含量。
6、结果计算：
x（g/kg）=m1*1000/（m*5/50*1000*1000）
式中：x——样品中甲醛含量，g/kg；
m1——从标准曲线上查出的被测液中的甲醛的含量，ug；
m——样品的质量，g。
7、工作曲线及检出限
本方法有良好的线性关系，所得标准曲线的相关系数r=0.9998,回归方程为:y=0.043x+0.0
09,甲醛的检出限为0.04ug.
8、回收率与精密度
分别添加50ug，200ug，600ug甲醛于样品中，按上述方法测定5次，计算平均回率（p）为99~101%，说明本方法准确度较高。相对标准偏差（rsd）为0.5~1.4%,精密度满足方法的要求，见表一。
表一
回收率（%）
________________________________________
添加量（ug）12345p（%）rsd（%）
5099.8101.4103.7101.2100.9101.41.3
200100.099.7103.499.9101.1100.81.4
60099.299.598.899.998.699.20.5
从以上结果可以看出,选取高、中、低三个浓度水平分别测定（n=5）被测组分的回收率,结
果良好,说明本方法准确度较高.rsd为0.5—1.4%,精密度满足方法的要求.由以上结果可见:本方法*适用于面制品等食品中甲醛含量的测定。
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1.2.1乙酰丙酮溶液：吸取3.0ml乙酰丙酮（ar）用水稀释至200ml。
1.2.2乙酸乙酸铵缓冲溶液：称取15.42g乙酸铵（ar）溶于300ml水中，加入2.3ml冰醋酸，调ph值近5.75，用水稀释至400ml。
1.2.3硫酸钠溶液：称取20g*（ar）溶于250ml烧杯中，加入100ml水溶解。
1.2.4乙酸锌溶液:称取20g乙酸锌（ar）加水溶解并稀释至200ml。
1.2.5氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠（ar）于500ml烧杯中,加水溶解并稀释至500ml。
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,6.0,8.0ug甲醛）于10ml比色管中，加入2ml乙酸—乙酸铵缓冲溶液和1ml乙酰丙酮溶液，加水至刻度，混匀，置70℃水浴中放置30min，取出冷却至室温后，用1cm比色杯，于412nm处以零号管调节零点，测定吸光度，以吸光度及甲醛的含量为纵、横坐标，绘制标准曲线。
4、样品处理
称取面制品样品5.00g于50ml具塞比色中,加入35ml硫酸钠溶液,加塞,混匀,置60℃水浴中放置一小时,并不断振摇,取出,冷却后,加入5ml乙酸锌溶液和3ml氢氧化钠溶液,用水定容至50ml,混匀,放置20min,3000r/min,离心,取上清液过滤,备用,同时做空白试验。
5、样品测定:
吸取上述样品处理液5.0ml于10ml比色管中,依自“加入2ml乙酸—乙酸铵缓冲溶液……”起同法操作，同时作空白，为参比液，根据测得的吸光度，从标准曲线上查出被测液中甲醛含量，从而计算出样品中甲醛的含量。
6、结果计算：
x（g/kg）=m1*1000/（m*5/50*1000*1000）
式中：x——样品中甲醛含量，g/kg；
m1——从标准曲线上查出的被测液中的甲醛的含量，ug；
m——样品的质量，g。
7、工作曲线及检出限
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09,甲醛的检出限为0.04ug.
8、回收率与精密度
分别添加50ug，200ug，600ug甲醛于样品中，按上述方法测定5次，计算平均回率（p）为99~101%，说明本方法准确度较高。相对标准偏差（rsd）为0.5~1.4%,精密度满足方法的要求，见表一。
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________________________________________
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5099.8101.4103.7101.2100.9101.41.3
200100.099.7103.499.9101.1100.81.4
60099.299.598.899.998.699.20.5
从以上结果可以看出,选取高、中、低三个浓度水平分别测定（n=5）被测组分的回收率,结
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