CCK-8细胞实验原理及步骤
一、原理： cck-8试剂盒用于快速灵敏地检测细胞增殖和细胞毒性。工作原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，wst-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2h-四唑单钠盐），可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan），其颜色的深浅与细胞增殖成正比，与细胞毒性成反比，对同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。使用酶标仪在450nm波长处测定od值，可以间接反映活细胞的数量。
二、用途：可用于细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。
三、实验步骤：
1.种板数：根据你摸索的，或者查阅文献确定你需要的种板浓度，根据种板浓度对细胞悬液进行稀释，通常细胞增殖实验每孔加入约1000-2000个细胞100ul，细胞毒性实验每孔加入约5000～10000个细胞100ul（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。
2.种板：以96孔板为例，96孔板横向是1-12的数字，纵向是a-h，可做多个实验组，每组设置4-6个复孔，同时设置空白组，最边缘孔加入pbs缓冲液减少蒸发带来的影响，然后将细胞置于37℃ 5%co2细胞培养箱中培养12-24 h。
3.加药及加药后孵育时间：观察细胞细胞贴壁良好，吸出各孔培养基，实验组加入含不同浓度药物的培养基，空白组加入不含药物培养基，然后将96孔板在37℃ 5% co2空气的细胞培养箱中孵育适当时间，根据不同实验细胞需求选择适当的孵育条件和时间。
4.加入cck-8：两种方法，每孔直接加入10ul的cck-8溶液,或者配置成含10%cck-8溶液的培养基以换液的形式加入,注意加入过程中避免产生气泡，可以将枪头浸入培养液中缓慢加入。
5.加入cck-8后孵育时间：将加完cck-8的培养板放入37°c 5%co2 培养箱中孵育1-4h，cck-8试剂加入后孵育时间也需要自己摸索，随着时间的增加，od值就会增大。可以在0.5h、1.0h、2.0h分别测od值，把od值控制在1.0左右。
6.测od值：将96孔板取出，酶标仪检测各孔在450nm波长处的od值，分析处理数据，绘制增殖曲线。
天价运费公司狂赚，又一国家对高运价出手
美国消费税税率是多少（美国各种税费大全）
颚式破碎机在使用上面需要注意什么呢？
美国港口：埃弗格雷斯港(port everglades,fl)港介绍、埃弗格雷斯港(port everglades,fl
亚马逊广告转化率低的原因都有哪些？
CCK-8细胞实验原理及步骤
加强上海空运在管理中改革的控制
广州到眉山物流专线 广州到眉山专线物流
LG电子新增自动驾驶和机器人两大业务部
塞浦路斯海运利马索尔港介绍
电厂在线监测变色树脂的技术原理与方法
国际物流服务费用 国际物流海运费用多少钱一吨
在加拿大上大学一年要多少钱
加拿大港口：科灵伍德(collingwood)港介绍、科灵伍德(collingwood)港代码
《福建省海漂垃圾综合治理奖补资金管理办法》发布
亚马逊卖家怎样选择物流方式
国际快递到美国一定要正式报关吗？（国际快递清关流程是怎样的）
意大利PIZZATO单向轮位置开关一般特征
全球首艘零排放氢动力推船交付
海运出口到美国服务热线
二、用途：可用于细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。
三、实验步骤：
1.种板数：根据你摸索的，或者查阅文献确定你需要的种板浓度，根据种板浓度对细胞悬液进行稀释，通常细胞增殖实验每孔加入约1000-2000个细胞100ul，细胞毒性实验每孔加入约5000～10000个细胞100ul（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。
2.种板：以96孔板为例，96孔板横向是1-12的数字，纵向是a-h，可做多个实验组，每组设置4-6个复孔，同时设置空白组，最边缘孔加入pbs缓冲液减少蒸发带来的影响，然后将细胞置于37℃ 5%co2细胞培养箱中培养12-24 h。
3.加药及加药后孵育时间：观察细胞细胞贴壁良好，吸出各孔培养基，实验组加入含不同浓度药物的培养基，空白组加入不含药物培养基，然后将96孔板在37℃ 5% co2空气的细胞培养箱中孵育适当时间，根据不同实验细胞需求选择适当的孵育条件和时间。
4.加入cck-8：两种方法，每孔直接加入10ul的cck-8溶液,或者配置成含10%cck-8溶液的培养基以换液的形式加入,注意加入过程中避免产生气泡，可以将枪头浸入培养液中缓慢加入。
5.加入cck-8后孵育时间：将加完cck-8的培养板放入37°c 5%co2 培养箱中孵育1-4h，cck-8试剂加入后孵育时间也需要自己摸索，随着时间的增加，od值就会增大。可以在0.5h、1.0h、2.0h分别测od值，把od值控制在1.0左右。
6.测od值：将96孔板取出，酶标仪检测各孔在450nm波长处的od值，分析处理数据，绘制增殖曲线。
天价运费公司狂赚，又一国家对高运价出手
美国消费税税率是多少（美国各种税费大全）
颚式破碎机在使用上面需要注意什么呢？
美国港口：埃弗格雷斯港(port everglades,fl)港介绍、埃弗格雷斯港(port everglades,fl
亚马逊广告转化率低的原因都有哪些？
CCK-8细胞实验原理及步骤
加强上海空运在管理中改革的控制
广州到眉山物流专线 广州到眉山专线物流
LG电子新增自动驾驶和机器人两大业务部
塞浦路斯海运利马索尔港介绍
电厂在线监测变色树脂的技术原理与方法
国际物流服务费用 国际物流海运费用多少钱一吨
在加拿大上大学一年要多少钱
加拿大港口：科灵伍德(collingwood)港介绍、科灵伍德(collingwood)港代码
《福建省海漂垃圾综合治理奖补资金管理办法》发布
亚马逊卖家怎样选择物流方式
国际快递到美国一定要正式报关吗？（国际快递清关流程是怎样的）
意大利PIZZATO单向轮位置开关一般特征
全球首艘零排放氢动力推船交付
海运出口到美国服务热线