方法验证用100CFU™支原体标准品
支原体核酸检测法（常规pcr、荧光定量pcr）应用于细胞培养、生物制药工业和细胞治疗领域具有很多优势。和传统方法比较，它具有①灵敏度高，特异性好。②时间短，2-3小时出结果。③操作简单等特点，可替代传统的培养法和dna染色法。
欧洲药典（ep 2.6.7）规定，支原体核酸法如要替代【指示细胞培养法】（又称为dna染色法），需要验证核酸法灵敏度达到100cfu/ml，并根据支原体污染发生的频率，*选择下列9种支原体进行检测：
*支原体口腔支原体鸡败血支原体肺炎支原体关节液支原体发酵支原体猪鼻支原体莱氏无胆甾原体柠檬螺原体
据小编市场调查后发现，德国mb公司（全称minerva biolabs）生产的【100cfutm灵敏度标准品】广泛被国内外各大药厂用于支原体核酸法的方法学验证，被称为该领域的“金标准”。
【100cfutm灵敏度标准品】为冻干粉形式，一共有10种（见下表），其中涵盖了欧洲药典（ep 2.6.7）列举的9个支原体物种，可用于qpcr和pcr方法的灵敏度以及耐用性验证，使得核酸法可作为dna染色法的替代方法。
货号
品名
规格
nctc编号
atcc编号
103-1003
*支原体
标准品3管，
阴性对照2管/盒
10129
23838
103-2003
口腔支原体
10112
23714
103-3003
鸡败血支原体
10115
19610
103-4003
肺炎支原体
10119
15531
103-5003
关节液支原体
10124
25204
103-6003
发酵支原体
10117
19989
103-7003
猪鼻支原体
10130
17981
103-8003
莱氏无胆甾原体
10116
23206
103-9003
柠檬螺原体
10164
27556
103-1103
唾液支原体
10113
23064
保存：冻干粉在2-8℃保存
产品特点：
1) 来自英国菌种保藏中心nctc，为标准支原体株
2) 支原体已灭活，不会对实验室造成污染，保障细胞实验室安全
3）传代次数少，支原体无变异
4）产品为冻干粉，保证其稳定性
5）分析证书（coa）提供该批次gu：cfu比值（支原体基因组/菌落数比值）
注意：
1.使用时，应严格遵循说明书操作流程。任何偏离可能会造成结果误差。
2.加入100cfu标准品的样品不能超滤浓缩，否则会导致结果不可靠。
3.标准品不建议稀释。
使用说明：
试剂使用前，先达到室温平衡。
1. 标准品管离心，以收集冻干粉至管底。
2. 每管加入1ml样品基质液。
3. 室温静置5分钟。
4. 涡旋振荡10秒钟，再离心5秒钟。
5. 使用合适体积的标准品用于dna抽提。*使用mb公司生产的支原体*（品名：venor®gem sample preparation kit）。
6. 使用合适体积的抽提dna用于pcr扩增。
阴性对照样品的制备，步骤同上。*适当重复试验，并*使用mb公司的常规pcr检测试剂盒 (品名：venor®gem classic， 货号11-1025/-1050/-1100/-1250) 或qpcr试剂盒 (品名：venor®gem qep，货号11-9025/-9100/-9250)。
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【100cfutm灵敏度标准品】为冻干粉形式，一共有10种（见下表），其中涵盖了欧洲药典（ep 2.6.7）列举的9个支原体物种，可用于qpcr和pcr方法的灵敏度以及耐用性验证，使得核酸法可作为dna染色法的替代方法。
货号
品名
规格
nctc编号
atcc编号
103-1003
*支原体
标准品3管，
阴性对照2管/盒
10129
23838
103-2003
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10112
23714
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10115
19610
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10119
15531
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10124
25204
103-6003
发酵支原体
10117
19989
103-7003
猪鼻支原体
10130
17981
103-8003
莱氏无胆甾原体
10116
23206
103-9003
柠檬螺原体
10164
27556
103-1103
唾液支原体
10113
23064
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1) 来自英国菌种保藏中心nctc，为标准支原体株
2) 支原体已灭活，不会对实验室造成污染，保障细胞实验室安全
3）传代次数少，支原体无变异
4）产品为冻干粉，保证其稳定性
5）分析证书（coa）提供该批次gu：cfu比值（支原体基因组/菌落数比值）
注意：
1.使用时，应严格遵循说明书操作流程。任何偏离可能会造成结果误差。
2.加入100cfu标准品的样品不能超滤浓缩，否则会导致结果不可靠。
3.标准品不建议稀释。
使用说明：
试剂使用前，先达到室温平衡。
1. 标准品管离心，以收集冻干粉至管底。
2. 每管加入1ml样品基质液。
3. 室温静置5分钟。
4. 涡旋振荡10秒钟，再离心5秒钟。
5. 使用合适体积的标准品用于dna抽提。*使用mb公司生产的支原体*（品名：venor®gem sample preparation kit）。
6. 使用合适体积的抽提dna用于pcr扩增。
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