担负分离作用的色谱柱是液相色谱仪的心脏,柱效高、选择性好、分析速度快是对色谱柱的一般要求。商品化hplc微粒填料,粒度通常为3µm、5µm、7µm及10µm。超高压液相色谱中采用的固定相粒度甚至可以小到1µm,而制备色谱所采用的固定相粒度通常大于10µm。
填充hplc柱柱效的理论值可达到每米50000~160000理论塔板数。每米5000理论塔板数柱效的色谱柱即可满足一般样品分析的要求。较难分离的样品可能需每米20000理论塔板数柱效的柱子,因此采用100~300mm的柱长就能满足大多数样品分析的需要。
液相色谱柱可依柱径大致分为三种类型:内径小于2mm的称为细管径柱或微管径柱;内径在2~5mm的是常规液相色谱柱;内径大于5mm的称为半制备柱或制备柱。细管径柱中流动相流量小,体积峰宽随之减少,也减小了对样品的稀释,有利于提高峰高灵敏度。另一方面,细管径柱柱体积小,柱外效应的影响将不容忽视,需要配备更小池体积的检测器和小流量泵,对柱接头、连接管以及进样设备也有更高要求。
关键词:色谱柱 液相色谱仪
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