免疫酶技术中浓度如何选择
在免疫酶技术中，我们首先要确定的变异因素就是酶标记物的工作浓度。因为酶标记物浓度的很小变化，便可导致试验结果产生很大的波动。另外，由于浓度过高，可使非特异性反应增加，而浓度过低又可影响测定的敏感性。因此，正式试验前必须准确滴定其工作浓度。
1. 酶标记抗体的滴定方法是：将抗原（或抗体）物理吸附于固相载体上，然后将经过一系列稀释的酶标抗体（或抗ig抗体）与吸附在载体上的抗原（或抗体）起反应，以酶与底物的显色反应程度来确定酶标记抗体的效价，或称工作浓度。
2. 其步骤为：先将抗原（或抗体）用0.05m ph9.6包被缓冲液稀释为10μg/ml左右，于聚苯乙烯板孔内加0.1ml，4℃一夜，次日以洗涤缓冲液洗涤3次。酶标记抗体用1%bsa-pbs液依次稀释成1:100，1:200，1:400，1:800，1:1600（根据据抗体的滴度而定），分别加入反应孔中，每个稀释度二孔，每孔0.1ml，37℃孵育1小时后洗涤。然后加底物液，每孔0.1ml，37℃10～30分钟。以2m h２so4 0.05ml终止反应。
3. 结果判定主要以elisa比色仪读取各孔od值，并以od为纵座标，结合物浓度为横座标，绘制滴定曲线。由曲线上查得od值为1.0左右，且曲线斜率zui大时的酶标抗体稀释度，即为该标记物的工作浓度。
上海纪宁生物科技有限公司主要经营进口、国产elisa试剂盒、细胞、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、免疫酶等产品，是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生物科学公司,产品国内大部分地区。公司专注于高品质elisa试剂盒的整合和研发，打造国内的elisa试剂盒。
关键词：比色仪
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2. 其步骤为：先将抗原（或抗体）用0.05m ph9.6包被缓冲液稀释为10μg/ml左右，于聚苯乙烯板孔内加0.1ml，4℃一夜，次日以洗涤缓冲液洗涤3次。酶标记抗体用1%bsa-pbs液依次稀释成1:100，1:200，1:400，1:800，1:1600（根据据抗体的滴度而定），分别加入反应孔中，每个稀释度二孔，每孔0.1ml，37℃孵育1小时后洗涤。然后加底物液，每孔0.1ml，37℃10～30分钟。以2m h２so4 0.05ml终止反应。
3. 结果判定主要以elisa比色仪读取各孔od值，并以od为纵座标，结合物浓度为横座标，绘制滴定曲线。由曲线上查得od值为1.0左右，且曲线斜率zui大时的酶标抗体稀释度，即为该标记物的工作浓度。
上海纪宁生物科技有限公司主要经营进口、国产elisa试剂盒、细胞、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、免疫酶等产品，是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生物科学公司,产品国内大部分地区。公司专注于高品质elisa试剂盒的整合和研发，打造国内的elisa试剂盒。
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