制备单克隆抗体时有哪些具体步骤
一抗可用于检测糖尿病、癌症、阿尔茨海默病和帕金森病的生物标志物。二抗则主要用于检测和纯化抗原蛋白。二抗在标记和检测方面比较灵敏和灵活。所以，它们在流式细胞术、蛋白质印迹和细胞成像等一系列应用中用于一抗的比色、化学发光和荧光检测。二抗类型的选择基于一抗的类别：免疫球蛋白igg或igm、标签类型和来源宿主。制备单克隆抗体时有哪些具体步骤：
一、免疫动物选择
根据需要产生目标抗原的免疫反应，选择合适的免疫动物。例如，小鼠是免疫动物之一，因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内，通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线，如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞，与骨髓瘤细胞或其他癌细胞（如sp2/0、ns0等）融合，形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用（peg）或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选，一般使用hat选择性培养基，通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择，筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系，并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式。
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