饲料中L-肉碱的液相色谱(HPLC)检测方案

左旋肉碱(l-肉碱)又称肉毒碱,是一种水溶性氨基酸,由赖氨酸衍生而来。分子结构为l-γ-*胺β-羟丁酸,分子式为c7h16no3,分子量为161.2。它是b族维生素类似物,曾被称为*t。其分子结构中含有一个可供脂肪酸脂化的羟基,其饱和键和极性官能团有良好的水溶性和吸湿性,200℃以上它仍稳定存在,可在ph3~6的溶液中放置一年以上而不变坏。1998年我国卫生部将l-肉碱批准为食品添加剂,列入营养强化剂类。
科晓仪器公司利用全新高性能的
以下是饲料中l-肉碱的详细检测方法。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
1.2 试剂
异丙醇,色谱纯。
甲醇,色谱纯。
乙腈,色谱纯。
*。
磷酸二氢钾。
三乙醇胺。
柠檬酸。
氧化银。
肉碱衍生剂。
2  测定原理
样品经加乙醇超声提取后,然后加入肉碱衍生剂,将衍生物注入液相色谱反相柱上进行分离,用紫外检测器在210nm波长处定量测定。
3  试样溶液的制备
称取5g试样于100ml烧杯中,加入30ml无水乙醇,溶解并转移至100ml容量瓶中,先后用10ml无水乙醇分3次洗涤烧杯,样液转移至100ml容量瓶中,超声提取10min后用无水乙醇定容至刻度,混匀后于4000r/min离心5min。取上清液2ml,加入肉碱衍生剂0.25ml(衍生剂配制方法:40 mg p-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈,加入40% 氢氧化四丁基铵50 µl),混合后置于60℃恒温水温箱120 min,吸取20 µl进样分析。
4 色谱条件
色谱柱:vertex c18柱 250mm×4.6mm×5μm;
流动相:甲醇:磷酸盐=5:95
流速:1.0ml/min;
温度:室温;
进样量:20μl;
检测波长:210nm。
更多检测方案请直接与科晓仪器。

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