PCR技术中常用的耐热DNA聚合酶介绍
耐热dna聚合酶多应用在pcr技术中。各种耐热dna聚合酶均具有5'-3'聚合酶活性，但不一定具有3'-5'和5'-3'的外切酶活性。3'-5'外切酶活性可以消除 错配，切 平末端；5'-3'外切酶活性可以消除合成障碍。由于上述这些不同，可以将耐热dna聚合酶分为三类，下面远慕生物简单介绍一下。
一、普通耐热dna聚合酶
taq dna 聚合酶
由一种水生栖热菌yt1株分离提取出，是发现的耐热dna聚合酶中活性最高的一种，达200,000单位/mg。具有5'-3'外切酶活性，但不具有3'-5'外切酶活性，因而在合成中对某些单核苷酸错配没有校正功能。
taqdna聚合酶还要具有非模板依赖性活性，可将pcr双链产物的每一条链3'加入单 核苷酸尾，故可使pcr产物具有3'突出的单a核苷酸尾；另一方面，在仅有dttp存在时，它可将 平端的 质粒的3'端加入单t核苷酸尾，产生3'端突出的单t核苷酸尾。应用这一特性，可实现pcr产物的 t-a克隆法。
tth dna 聚合酶
从thermus thermophilus hb8中提取而得，该酶在高温和mncl2条件下，能有效地 逆转录rna；当加入mg2+后，该酶的聚合活性大大增加，从而使cdna合成与扩增可用一种酶催化。
二、高保真dna聚合酶
pfu dna 聚合酶
是从pyrococcus furiosis中精制而成的高保真耐高温dna聚合酶，它不具有5'-3'外切酶活性，但具有3'-5'外切酶活性，可校正 pcr扩增过程中产生的错误，使产物的 碱基 错配率极低。pcr产物为 平端，无3'端突出的单a核苷酸。
vent dna 聚合酶
该酶是从litoralis栖热球菌中分离出的，不具有5'-3'外切酶活性，但具有3'-5'外切酶活性，可以去除错配的碱基，具有校对功能。
三、dna序列测定中应用的耐热dna聚合酶
测序级taqdna聚合酶
是在taqdna聚合酶的基础上对它进行修饰，去除5'-3'外切酶活性，保证测序记过的高度准确性，可产生强度均一的测序条带，背景清晰。
bca best dna 聚合酶
从bacillus caldotenax yt-g菌株中提纯，并使其5'-3'外切酶活性缺失的dna聚合酶。它的伸长性能优越；可抑制 dna二级结构形成，可以得到均一的dna测序带。
sac dna 聚合酶
从酸热浴流化裂片菌中分离，无3'-5'外切酶活性，可用于dna 测序，但测序反应中ddntp/dntp的比率要高。
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由一种水生栖热菌yt1株分离提取出，是发现的耐热dna聚合酶中活性最高的一种，达200,000单位/mg。具有5'-3'外切酶活性，但不具有3'-5'外切酶活性，因而在合成中对某些单核苷酸错配没有校正功能。
taqdna聚合酶还要具有非模板依赖性活性，可将pcr双链产物的每一条链3'加入单 核苷酸尾，故可使pcr产物具有3'突出的单a核苷酸尾；另一方面，在仅有dttp存在时，它可将 平端的 质粒的3'端加入单t核苷酸尾，产生3'端突出的单t核苷酸尾。应用这一特性，可实现pcr产物的 t-a克隆法。
tth dna 聚合酶
从thermus thermophilus hb8中提取而得，该酶在高温和mncl2条件下，能有效地 逆转录rna；当加入mg2+后，该酶的聚合活性大大增加，从而使cdna合成与扩增可用一种酶催化。
二、高保真dna聚合酶
pfu dna 聚合酶
是从pyrococcus furiosis中精制而成的高保真耐高温dna聚合酶，它不具有5'-3'外切酶活性，但具有3'-5'外切酶活性，可校正 pcr扩增过程中产生的错误，使产物的 碱基 错配率极低。pcr产物为 平端，无3'端突出的单a核苷酸。
vent dna 聚合酶
该酶是从litoralis栖热球菌中分离出的，不具有5'-3'外切酶活性，但具有3'-5'外切酶活性，可以去除错配的碱基，具有校对功能。
三、dna序列测定中应用的耐热dna聚合酶
测序级taqdna聚合酶
是在taqdna聚合酶的基础上对它进行修饰，去除5'-3'外切酶活性，保证测序记过的高度准确性，可产生强度均一的测序条带，背景清晰。
bca best dna 聚合酶
从bacillus caldotenax yt-g菌株中提纯，并使其5'-3'外切酶活性缺失的dna聚合酶。它的伸长性能优越；可抑制 dna二级结构形成，可以得到均一的dna测序带。
sac dna 聚合酶
从酸热浴流化裂片菌中分离，无3'-5'外切酶活性，可用于dna 测序，但测序反应中ddntp/dntp的比率要高。
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