RD蛋白含CF与不含CF的区别

在浏览网站的重组蛋白产品时,大家常常会对品名中的「cf」产生疑惑。cf 代表什么含义?品名中含/不含 cf 的蛋白有什么区别?哪种产品更适用于我的实验?本文一一来解惑。
1. cf 其名,其意
cf,是 carrier free 的意思。一般来说,为了对重组蛋白的结构及活性进行保护,我们会在蛋白产品中添加牛血清白蛋白(bsa)作为载体蛋白。但考虑到 bsa 会对某些实验造成影响,我们又研发出不含载体蛋白(bsa)的产品,即 carrier free 蛋白。
注:并不是所有不标注 cf 的蛋白产品都含有 bsa,产品的具体成分需要参考产品说明书或 coa。
2. cf 蛋白与普通蛋白产品的区别
是否添加 bsa 是 cf 蛋白产品与普通蛋白产品大的区别。这一区别使得冻干粉重溶溶液的选择以及重组蛋白的用途有所差异。
在蛋白冻干粉重溶时,cf 蛋白产品只要使用说明书*的溶液溶解到规定的浓度即可,而普通蛋白产品为了保证产品不会吸附到管壁上,为蛋白产品的重溶提供一个良好的环境,在溶液中还要额外添加 0.1% 的 bsa。
所需添加的 bsa 要求很高:不能含有蛋白酶,并且是 fraction v 纯度的 bsa。r&d systems®提供各类含 bsa 的蛋白重溶溶液,如:rb02(bsa / pbs)和rb04(bsa/hcl),可以根据蛋白的重溶要求自行选择。
在用途上,一般情况下,我们建议使用含有 bsa 的重组蛋白用于细胞或组织培养,或作为 elisa 标准品。相对而言,当 bsa 可能会干扰实验时,比如体内实验、蛋白标记等,则*使用 cf 蛋白。另外,如果实验平台有特殊要求,也应根据要求选择不含 bsa 的蛋白。
举例产品:recombinant human il-6 (hek293-expressed) protein, cf(货号 7270-il/cf)/ recombinant human il-6 (hek293-expressed) protein(货号 7270-il)
3. cf 蛋白维持高活性的秘诀
对比 cf 蛋白和普通蛋白,无论蛋白是否添加 bsa,它们的生物学活性实验结果、运输条件、保存条件及效期都没有区别。既然没有 bsa 作为蛋白载体,是什么让 cf 蛋白保持良好的稳定性和生物学活性呢?
举例产品:recombinant human tnf-alpha (hek293-expressed) protein, cf
答案就在说明书 formulation 那一栏里,我们在蛋白中添加了海藻糖。海藻糖是一种以两个葡萄糖分子通过 α,α,1,1-糖苷键连接的二糖。海藻糖是一种非还原糖,不与氨基酸或蛋白质发生反应。
它本身不存在于哺乳动物体内,但哺乳动物体内却广泛存在分解海藻糖的酶,且海藻糖作为一种小分子的半抗原,哺乳动物对其免疫反应性很低。这使得海藻糖对活体实验或异种移植等实验的干扰极小。
海藻糖不仅可以防止蛋白在脱水状态下改变其结构,更能在高温、低温、高渗透压的条件下保留蛋白的生物学活性。目前,海藻糖以其高效的蛋白保护性能与相对低廉的价格渐渐代替 bsa,成为免疫实验产品和蛋白类产品添加剂的新宠。

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