什么是胎牛血清?胎牛血清是通过母牛剖腹产胎牛心脏密闭穿刺采血获得的新鲜胎牛全血,经自然层析、离心后收集得到去除血细胞、纤维蛋白等成分的淡黄色透明上清液体,后经生产使用多级高置流膜过滤技术和三级0.1?m终端微滤方法处理后,常用于细胞培养相关实验。
正确地使用胎牛血清可分为以下四个方面:
1. 正确储存,避免反复冻融
1) 血清在-20°c冻存。
2) 血清避免反复冻融,以免降低因子活性。如一次用不完,应进行分装。
3) 血清和培养基应尽可能“现用现配”,配好的培养液,应于一周内用完。
4) 血清避免在4°c或更高温度静置过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。
2. 正确的融化
上流行的【血清融化三步法】可大限度地保存血清中因子的活性,不会产生沉淀,同时能缩短血清融化时间。
3. 关于胎牛血清的灭活
真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体,如果针对补体灭活的话,就不需要。其他情况根据实验设计来决定。
4. 胎牛血清的浓度
胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成*培养基。
曾有文献报道,不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响,尤其是干细胞和原代细胞。具体佳浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。
以上仅供参考,希望对您有所帮助!
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