液相色谱-紫外检测法测定水产品中组胺含量
生物胺是一类含氮的有机化合物,主要有脂肪类、芳香类或杂环类。其中脂肪族生物胺包括腐胺、尸胺、精胺、亚精胺等,芳香族包括酪胺、等,杂环类包括组胺、色胺等。在人和动物身体细胞中,存在适量的生物胺比如组胺、色胺、精胺等,在调节机体生长、增强机体新陈代谢活力、控制血压、消除自由基等方面具有明显作用。生物胺在很多食品中都存在,尤其是蛋白质含量丰富的食品,主要包括动物源食品和发酵类食品。生物胺具有一定的毒性作用,各种胺类毒性大小不同,其中组胺对人体健康的影响zui大。
组胺又称组织胺,是一种过敏性毒yao,化学式是c5h9n3,分子量是111,大量食用后会引起不良反应。水产品中的组胺主要是鱼肉在腐朽过程中其机体中的组胺酸通过其中存在的微生物所产生的组胺酸脱羧酶的脱羧作用而生成。组胺中毒是水产食品存在的主要安全问题之一,全国各地尤其是沿海地区组胺中毒事件时有发生。当有机体摄入组胺超过100mg时,即可引起过敏性食物中毒,口服8-40mg组胺将引起轻微中毒症状,超过40mg产生中等中毒症状,如果超过100mg将产生严重中毒症状。美国食品药品就爱你度管理局过对爆发组胺中毒的大量数据的研究,确定组胺的危害作用水平为500mg/kg。欧盟规定鲭科鱼类中组胺含量不得超过100mg/kg,其他食品中组胺不得超过100mg/kg,酪胺不得超过100-800mg/kg。
目前组胺的测定方法有很多gb/t 5009.45-2003中的水产品卫生标准的分析方法、gb/t 5009。208-2008中的食品中生物胺含量的测定和gb/t20768-2006中的鱼和虾中有毒生物胺的测定、液相色谱-紫外检测法等方法以及相关的文献中提到了偶氮显色法、苯甲酰氯衍生液相色谱法、单酰氯衍生液相色谱法、毛细管电泳法、离子色谱法、波层色谱法和生物电化学法。液相色谱法由于其具有分析速度快、注效高、检测灵敏度高、定量分析准确等特点,基本取代了其他方法,是目前生物胺含量分析测定的主要手段。衍生方法主要有柱前衍生和柱后衍生,常用的衍生化试剂有领苯二甲醛、丹磺酰氯、偶氮试剂和苯甲酰氯等,领苯二甲醛存在衍生物不稳定等不足,苯甲酰氯不溶于水,衍生效果差,偶氮显色法容易受到基质中杂质的干扰,影响测定结果。丹磺酰氯具有较理想的衍生效果和稳定时间。而有些标准中盐溶液作为流动相,会对分析柱造成损害。本研究综合了相关的标准和文献,以鲭鱼为代表对液相色谱法测定水产中组胺含量进行了方法改进。
仪器准备
仪器简介
lc-600a智能全控液相色谱系统由p600高压恒流泵与uv600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用ws600工作站可以同时控制数台p600高压恒流泵、uv600紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。
应用领域
化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析
质谱条件:
进样量
20μl
柱温
35℃
流动相流速
1.0ml/min
检测波长
254nm
测定结果:
关键词:紫外检测器
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