SRM 1649b 城市尘埃中PAHs对皮肤细胞的影响

cck8 细胞毒性实验检测 srm1649b 对皮肤角质形成细胞及皮肤成纤维细胞增殖的影响
已有研究表明 pahs 可以破坏皮肤角质层及紧密连接,皮肤屏障受损是皮肤敏感 患者的发病的主要病因,然而 pahs 是否作用于皮肤细胞的衰老和老化至今仍不清 楚。为此,下面采用了一种成分为 srm1649b 的 pahs 标准品来刺激皮肤角质细胞和皮肤成纤维细胞,首先观察在 srm1649b 刺激下,这些皮肤细胞是否出现老化现象。 通过不同浓度,以及不同处理时间的 srm1649b 刺激,hacat 及 nhdf 细胞均出现 增殖能力减弱的现象,并且与刺激浓度与时间呈现明显的负相关(p<0.05)。而增殖 能力减弱正是细胞出现衰老的首要表型之一。这部分研究结果提示 srm 1649b 城市尘埃 潜在调控皮肤细胞衰老。
srm1649b 对皮肤角质形成细胞及皮肤成纤维细胞周期的影响
通过 cck8 实验检测发现,srm1649b 处理时,hacat 及 nhdf 细胞均出现增 殖能力减弱的衰老表型。为进一步证实这个现象,在接下来检测在不同浓度的 srm1649b 刺激下,hacat 及 nhdf 细胞的细胞周期是否出现变化。实验结果显示 hacat 在 srm1649b 刺激时,随着刺激浓度的加大,细胞周期明显阻滞在 g1/s 期。 同样为了进一步证实细胞被阻滞在 g1/s 期,我们检测了 g1 期向 s 期转化的关键调 控分子,cyclin a 以及 skp2 的表达量。结果一致显示,随着刺激浓度的加大,这两 个分子的表达受到了极大的抑制。而用 srm1649b 刺激 nhdf 细胞时,发现细胞周 期不同程度的被阻滞在 g1/s 期,提示 srm1649b 多个作用途径的导致皮肤细胞阻滞。 这些结果进一步提示 srm 1649b 城市尘埃刺激下,皮肤细胞通过细胞周期的阻滞来导致增殖 减弱。
srm1649b 对皮肤角质形成细胞及皮肤成纤维细胞凋亡的影响
除了 srm 1649b 城市尘埃等 pahs 能导致细胞增殖能力减弱,细胞周期阻滞以外。最重 要的一个方面是,它能破坏被处理的细胞 dna 损伤修复系统,使细胞积累大量的 dna 损伤,从而导致细胞死亡,或者恶性突变。这也是皮肤细胞接受这些刺激时发 生病变的最主要因素。为此,在接下来利用凋亡检测实验检测 srm1649b 刺激时, 皮肤细胞的死亡是否增加?结果同样显示:随着 srm1649b 刺激浓度的增大,hacat 及 nhdf 细胞均出现了大量的凋亡。
总结:srm1649b 刺激时,hacat 及 nhdf 细胞均体现出显著的衰老表型,即 增殖能力减弱,细胞周期阻滞和细胞凋亡增加。以上三部分实验结果证实 srm 1649b 城市尘埃能显著导致皮肤细胞衰老。
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