mRNA Science

mrna 或信使 rna 是由核糖体翻译用于蛋白质合成的单链 rna 模板。雅各布和莫纳德创造了“信使rna”一词。它是一条长聚合物链,由通过磷酸二酯键共价连接的核苷酸组成。它含有四个含氮碱基,腺嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶和鸟嘌呤。rna 和其中一条 dna 链是互补的,但在 dna 中,尿嘧啶取代了胸腺嘧啶。
成熟的 mrna 由以下区域组成:5' 帽、5' utr、编码区、3' utr 和 poly(a) 尾部。
编码区域:它是一串密码子,即核苷酸的三联体。每个密码子都编码一个特定的氨基酸,该氨基酸通过核糖体翻译成多肽链中的氨基酸。编码区的起始密码子是“aug”,并以任何终止密码子结尾,即 uaa、uag 或 uga。编码序列的一部分可能具有调节功能。
未翻译区域 (utr)分别位于编码区域之前和之后的 5' 和 3' 区域。未翻译区域存在于起始密码子之前和终止密码子之后。它们参与基因表达。它们在 mrna 定位、翻译和 rna 稳定性中也起着至关重要的作用。
5' cap- 甲基鸟苷三磷酸帽存在于 5' 端。
poly(a) tail-a聚腺苷酸尾巴位于 3' 端。
在大多数真核生物中,当 mrna 编码一种蛋白质时,mrna 的编码区被称为单顺反子。在原核生物中,大多数 mrna 编码一种以上的蛋白质;这称为多顺反子。这些蛋白质大多具有相关功能,并由具有启动子和操作子区域的单个调控区调控。在人类中,线粒体基因组是多顺反子的。
mrna 的合成 – 转录和加工
转录是从 dna 合成 mrna 的过程。
在原核生物中,所有类型的 rna 都由单个 dna 依赖性 rna 聚合酶转录。在这里,不需要 mrna 处理;因此,转录和翻译可以耦合,因为这两个过程都发生在胞质溶胶中。
在真核生物中,rna 聚合酶 ii 转录前 mrna。pre-mrna 或主转录本随后在细胞核中进一步转化为 mrna。它被称为hnrna,或异质核rna。然后将成熟的 mrna 转移到胞质溶胶中进行翻译后处理。
转录从 dna 合成 rna 称为转录。以dna为模板,dna依赖性rna聚合酶在5'至3'方向上合成rna。极性为 5' 至 3' 的 dna 链称为“编码链”,而极性为 3' 至 5' 的 dna 链则称为“模板链”。转录rna的核苷酸序列与编码链匹配。
dna 中的转录单元由三个主要区域组成,所有参考都与编码链有关:
启动子存在于结构基因的 5' 末端。
启动子和终止子之间存在结构基因。
终止子存在于结构基因的 3' 末端。
转录的三个步骤如下:
起始:rna聚合酶通过与启动子区域结合开始转录,进一步启动dna双螺旋解旋。
外延:rna聚合酶将互补的三磷酸核苷作为底物添加到链中,并且随着dna双螺旋的广泛开放而继续延伸。rna 转录发生在 5' 到 3' 方向。
终止:转录停止,mrna 从 rna 聚合酶中分离。
加工hnrna,即新生成的 mrna 或初始转录本,必须经过处理才能成为成熟的 mrna。hnrna 经过转录后处理以产生成熟的 mrna。功能性 mrna 进一步从细胞核转运。翻译或蛋白质合成发生在细胞质中。
外显子和内含子都存在于 hnrna 中。转录后修饰包括剪接、加帽和拖尾。
剪接:该过程涉及从成熟的mrna链中切除内含子。
加帽:在这里,在hnrna的5'端添加核苷酸帽,即甲基鸟苷三磷酸。
拖尾:该过程处理在 3' 端添加 200-300 个腺苷酸残基。poly(a) 尾部保护 rna 免受核酸外切酶降解,还参与转录终止、mrna 转运和翻译。
核孔复合物在hnrna加工后将功能齐全的mrna转运到细胞质中,在那里它被翻译成多肽链。
mrna的类别:报告基因mrna:这些 mrna 类似于*全加工、加帽和多聚腺苷酸化的 mrna,并准备好通过核糖体进行翻译。大多数报告基因 mrna 可未经修饰或用 5-甲氧基尿苷修饰,以减少先天免疫反应。研究转染效率的理想对照。
基因组编辑 mrna:基因组编辑,也称为基因编辑,是指能够修饰生物体 dna 的一系列科学技术。在基因组中的特定位点,这些技术有助于添加、去除或修饰遗传物质。已经开发了几种基因组编辑方法。crispr-cas9 代表成簇的规则间隔短回文重复序列和 crispr 相关蛋白 9,是一个众所*知的例子。crispr-cas9 是一种天然存在的基因组编辑系统,细菌将其作为免疫反应进行部署。
疫苗 mrna:mrna 疫苗使用一种称为 mrna 的分子的拷贝来非法产生免疫反应。该疫苗将抗原编码的mrna输送到免疫细胞中,免疫细胞使用设计的mrna作为蓝图来构建通常由病原体(如病毒)或癌细胞产生的外来蛋白质。这些蛋白质分子激活适应性免疫反应,指示身体识别和消除相关的病原体或癌细胞。mrna通过封装在脂质纳米载体中的mrna的纳米制剂给药,其保护rna链并促进其吸收到细胞中。
基因替代 mrna:mrna在基因替代中的应用相当流行。许多蛋白质,包括膜结合的蛋白质、细胞内蛋白质或经过翻译后修饰或加工的蛋白质,不能被外源性蛋白质递送所取代。细胞内 mrna 表达大大增加了可通过蛋白质替代治疗的适应症数量。分泌的人促红细胞生成素 (epo) 蛋白可以使用酶联免疫吸附试验在血清中轻松检测。血细胞比容测定可用于确定epo对红细胞产生的刺激程度。
荧光 mrna:cy5 gfp mrna:cy5 gfp mrna被设计用于产生高表达水平的绿色荧光蛋白。它可用于控制转染效率。当用 cy5 标记时,可以很容易地追踪 f-luc mrna,以分析 mrna 的递送和翻译效率。
编程为自毁mrna是细胞的中间信使,是一种重要的安全机制。任何位于细胞外的rna都会立即被称为rnase的酶破坏,从而防止入侵者利用细胞机制制造外来蛋白质。这些酶在识别 rna 编码中的结构和 u 后破坏信息,保护细胞免受错误指令的影响。通过根据需要“打开”或“关闭”蓝图,mrna还为细胞提供了一种调节蛋白质合成速率的方法。信使rna的指令定时过期。代码中的 u、单链形式、核糖和 mrna 的独*序列都有助于其较短的半衰期。所有这些特征共同作用,使信息能够被“读取”,翻译成蛋白质,然后对于一些需要严格监督的蛋白质,在几分钟内迅速销毁,对于其他蛋白质,则长达几个小时。一旦指令消失,蛋白质生产就会停止,直到蛋白质工厂收到新的信息。
功能与应用mrna的主要作用是充当蛋白质生产的模板。位于细胞质中游离或附着在粗糙内质网上的核糖体可以进行翻译 (rer)。
rna 中存在的遗传信息被翻译成多肽链中存在的氨基酸。多肽链中氨基酸的顺序由 mrna 中的核苷酸或密码子序列决定。每个三重密码子或三核苷酸序列仅编码一种特定的氨基酸。多个密码子可用于编码氨基酸。密码子不重叠。
mrna 指导细胞合成蛋白质。修饰的mrna序列的施用可用于治疗疾病,也可以用作疫苗。辉瑞-biontech 和 moderna 疫苗是 mrna 疫苗的两个例子,它们已被批准限制使用,并且正在开发用于对抗 covid-/19 感染。
oz biosciences提供广泛的 mrna,这些 mrna 模拟*全加工的成熟 mrna。这些 mrna 通过使用 5' cap-1 结构和 3' poly(a) 尾部来稳定它们,从而针对稳定性和性能进行了优化。它们用 5-甲氧基尿苷(5mou 取代 u)或 n1-甲基假尿苷 (n1-mψ) 修饰以减少先天免疫反应。我们还提供未经修饰的 mrna。
以下是即用型mrna的类别:报告基因mrna:研究转染效率的理想对照
基因组编辑 mrna:cas9 mrna 用于 crispr 基因组编辑
疫苗mrna:非常适合作为免疫或疫苗研究的对照
基因替代 mrna:epo mrna的
荧光 mrna:cy5 gfp mrna、cy5 gfp mrna
我们提供微克到多克级的定制 mrna,从几百个碱基到几千个碱基不等,具有多种修饰,包括带帽的 5' 末端修饰、内部修饰(如 5-甲氧基尿苷(可提供其他修饰核苷酸))和 3' 修饰(如 poly-a 尾)。可使用 cy5、cy3 或其他选项进行荧光标记。

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