PCR扩增试剂盒实验扩增产物出现杂带的处理
pcr扩增试剂盒的标准品（冻干品）临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 u/l，然后做系列倍比稀释，分别配制成200 u/l，100 u/l，50 u/l，25 u/l，12.5 u/l，6.25 u/l，3.12 u/l，样品稀释液直接作为空白孔0 u/l。如配制100 u/l标准品则取0.3ml（不要少于0.3ml）200 u/l的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。pcr扩增试剂盒使用时要注意基础程序、扩增温度和延伸温度、反应时间、循环次数、pcr反应液的配制、pcr的反应动力学、pcr扩增产物以及pcr反应体系与反应条件。
若在进行pcr实验时扩增产物出现杂带该如何处理？
对于该现象可能的原因和对应的处理策略如下：
1.引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。
2.循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。
3.酶的用量偏高或酶的质量不好，应降低酶量或调换另一来源的酶。
4.退火温度偏低，退火及延伸时间偏长。应提高退火温度，减少变性与延伸时间，也可采用二种温度的pcr扩增。以2℃为梯度设计梯度pcr反应优化退火温度。
5.样品处理不当。
6.mg2+浓度偏高，因适当调整mg2+使用浓度。
7.若为pcr试剂盒，也可能时试剂盒本身质量有问题。推荐使用pcr扩增试剂盒，添加改良的dna聚合酶，大大提高扩增产物的特异性和保真性。
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