单克隆抗体是由单个b细胞克隆产生的高度均一、特异性针对某一抗原表位的抗体。通过使用杂交瘤技术,科学家们将具有分泌特异性抗体能力的致敏b细胞与具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合,形成了b细胞杂交瘤。
1975年分子生物学家g.j.f.克勒和c.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠b细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细胞培养,可形成单细胞系,即单克隆。利用培养或小鼠腹腔接种的方法,便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体,其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,而且在培养过程中,只要没有变异,不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。
单克隆抗体的优势和局限性
1.单克隆抗体的优点
(1)杂交瘤可以在体外“yong久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。
(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。
(3)由于可能得到“无限liang”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如irma和elisa等。
(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
2.单克隆抗体的局限性
(1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。
(3)制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高 。
单克隆抗体的应用
如今,单克隆抗体广泛应用于癌症治疗、医疗诊断和基础研究等方面。
①癌症治疗应用
用于癌症治疗的单克隆抗体旨在结合癌症细胞表面的抗原,相比于健康细胞,这种抗原通常在癌细胞过表达。通过“瞄准”这些抗原,抗体可以锁定癌细胞,并在免疫系统中充当其他免疫战士的“战斗号令”。
美国食品和药物管理局(fda)已经批准了100多种单克隆抗体用于治疗不同类型的癌症,包括乳腺癌、头颈癌、肺癌、肝癌、膀胱癌、黑色素瘤以及霍奇金淋巴瘤等。有报道称,单克隆抗体shou次用于晚期黑色素瘤,将部分患者的生存延长了10年之久。
②医疗诊断应用
单克隆抗体的出现,已经变革了多种疾病的实验室诊断。它们可作为生物化学分析的诊断试剂,也可作为疾病诊断影像的工具。基于单抗试剂的诊断检测一般可用于实验室中的放射免疫测定(ria)和酶联免疫吸附测定(elisa)。
单克隆抗体已用于例如妊娠、激素紊乱、传染病和癌症等疾病的早期诊断。
③基础研究应用
在基础研究中,研究人员可以使用单克隆抗体通过蛋白质印迹、流式细胞术、免疫组化(ihc)、酶联免疫吸附测定(elisa)等多种方法来识别目标分子。
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