支原体常规pcr检测试剂盒(经典法)(含taq酶)
venor®gem classic
货号
品名
规格
价格
11-1025g
支原体常规pcr检测试剂盒(经典法)(含taq酶)
venor®gem classic
25次/盒
询价
11-1050g
50次/盒
询价
11-1100g
100次/盒
询价
11-1250g
250次/盒
询价
特点
1.内控对照为独立包装,遵循欧洲药典和日本药典操作流程。
2.高特异性,仅一条阳性对照条带,即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。操作简单,
易于观察。
3.高灵敏度,若pcr反应体系加入10μl样本,支原体检测限度为≤5或≤10cfu。
(详见下文“(2)venor®gem classic kit 10种常见支原体检测限“)
4.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体,与细菌和真核dna无交叉反应。
5.试剂盒内包含taq酶,无需另外购买。
venor®gem classic kit
10种常见支原体检测限
物种
检测限
[cfu/ml]
物种
检测限
[cfu/ml]
莱氏无胆甾原体
≤5
肺炎支原体
≤10
猪鼻支原体
≤10
*支原体
≤10
发酵支原体
≤10
鸡败血支原体
≤10
口腔支原体
≤10
螺原体
≤10
关节液支原体
≤10
唾液支原体
≤10
操作步骤
第1步:样本处理
a. 细胞培养上清
b. 生物药或需遵循药典的样本
说明:①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。
②细胞培养物样本含丰富的dna酶,在低温下也能降解支原dna,影响检测灵敏度。
建议:样本做dna抽提处理,实现高灵敏度。
*:德国mb公司生产的支原体*venor® gem sample preparation kit该dna抽提试剂盒已经过广泛验证。
第2步:试剂制备
第3步:pcr体系建立
a. 细胞培养上清
b. 生物药或需遵循药典的样本
第4步:启动pcr反应
第5步:电泳结果分析
191bp为内控对照条带,表明pcr反应正常。
当样本存在支原体污染时,由于内控对照与支原体dna存在竞争,内控对照条带变弱(例如支原体dna>103拷贝)。
阳性对照中支原体dna>104拷贝,内控对照条带会*消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带,此条带不影响检测结果。
如果待测样本对pcr产生抑制,则内控对照条带变弱(和阴性对照相比),此时应*行dna抽提(*使用:venor® gem sample preparation kit支原体dna抽提试剂盒,详见第25页),然后再检测。
储存条件
2~8℃至少6个月。复溶后在-18℃保存。
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