高氏1号培养基制备的操作步骤
高氏1号培养基制备的操作步骤
1、称量和溶化 按配方先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的沸水中，继续加热，使可溶性淀粉wan全溶化。然后再称取其他各成分，并依次溶化，对微量成分feso4 ．7 h2 o可先配成高浓度的贮备 液，按比例换算后再加入。待所有试剂wan全溶解后，补充水分到所需的总体积。 配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。
2、调ph 用试纸测培养基的原始ph,如果偏酸，用滴管向培养基中加入1mol/lnaoh,边滴边搅拌，并随时用ph试纸测其ph,直至ph达7.6。反之，用1mol/lhci进行调节。
3、分装和加塞 将配制的培养基分装入试管内，在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。
4、包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，其外再用一根麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
5、 灭菌 将上述培养基以1210c,20min,0.103mpa高压蒸汽灭菌。
6、搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷却至500c左右，将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当，使斜面的长度约为管长 1/3。
7、无菌检查 将灭菌培养基放入37℃的培养箱中培养24～28h，以检查灭菌是否彻di。和改良的差别就在于有没有feso4· 7h2o 高氏常常配完后变成褐色也是由于fe2+氧化为fe3+的关系，所以常常有人用螯合的feso4，防止氧化。
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