polyplus转染试剂jetOPTIMUS®产品说明书
polyplus转染试剂jetoptimus®产品说明书本说明书以dna转染为例进行说明：
第0天：细胞接种
→根据下表在v ml细胞生长培养基中接种细胞
培养皿
细胞数量
v=转染过程中培养基的体积
96孔
7500 - 25000
0.125 ml
24孔
40000 - 100000
0.5 ml
12孔
80000 - 200000
1 ml
6孔/35mm
150000 - 400000
2 ml
60mm/25cm2烧瓶
200000 - 850000
5 ml
100mm/75cm2烧瓶
1 x 106- 4 x 106
10 ml
*备注：对于特定的细胞类型或悬浮细胞，请参考完整的方案。
第1天：使用jetoptimus®试剂进行转染
→仅使用jetoptmus®缓冲液
→以60-80%融合率转染细胞
培养皿
w=jetoptimus®缓冲液的体积
x=添加的dna量
y=jetoptimus®体积
96孔
12.5 µl
0.13 µg
0.13-0.19 µl
24孔
50 µl
0.5µg
0.5-0.75 µl
12孔
100 µl
1µg
1-1.5 µl
6孔/35mm
200 µl
2µg
2-3 µl
60mm/25cm2烧瓶
500 µl
4µg
4-6 µl
100mm/75cm2烧瓶
1000µl
10µg
10-15 µl
第2-3天：测量基因表达
protocol优化：
（1）测试不同的dna量：x、0.5 x和1.5 x。
（2）测试不同的dna/jetoptimus®比例，1:1至1:1.5。
（3）有关细胞特异性协议，请联系益元利康客服获取。
培养皿
w=jetoptimus®缓冲液的体积
x=添加的dna量
y=jetoptimus®体积
96孔
12.5 µl
0.10-0.20 µg
0.10-0.30 µl
24孔
50 µl
0.25-0.75 µg
0.25-1 µl
12孔
100 µl
0.5-1.5 µg
0.5-2.25 µl
6孔/35mm
200 µl
1-3 µg
1-4.5 µl
60mm/25cm2烧瓶
500 µl
2-6 µg
2-9 µl
100mm/75cm2烧瓶
1000µl
5-15 µg
5-22 µl
提高敏感细胞细胞活力的提示：
（1）转染后4小时更换培养基。
（2）将dna量减少到0.5倍，同时保持之前使用的dna/jetoptimus®比例。
（3）在较早的时间点（例如转染后24小时而不是48小时）分析转染。
（4）在敏感细胞的还原血清培养基中进行转染。
（5）检查靶基因是否影响细胞活力。
（6）确保细胞在转染前已传代两次以上且少于20次。
（7）丢弃过度培养的细胞。
良好的dna转染实践：
（1）适当储存jetoptimus®（5±3°c）。
（2）定期检查支原体污染情况。
（3）使用报告基因来建立和优化转染条件。
（4）血清质量可能严重影响转染效率。购买新一批血清时或胰蛋白酶检查细胞活力以及转染效率。
更多有关polyplus转染试剂jetoptimus®产品说明书的内容，请联系益元利康客服！
polyplus转染试剂jetoptimus®产品说明书提供商——天津益元利康生物科技有限公司成立于2018年，坐落于天津经济技术开发区。公司产品线涉及细胞与基因治疗、免疫学、分子
生物学、细胞生物学等多个方向，专注于生命科学试剂、耗材、细胞、仪器等产品销售，经营的品牌主要有：thermofisher、
sigma、qiagen、ezbioscience、zymo research、medkoo、abcam、polyplus等等。我们提供质优价美的产品、及时到位的服务，
努力成长为生命科学和生物技术企业的优质供应商。
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0.5 ml
12孔
80000 - 200000
1 ml
6孔/35mm
150000 - 400000
2 ml
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200000 - 850000
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1 x 106- 4 x 106
10 ml
*备注：对于特定的细胞类型或悬浮细胞，请参考完整的方案。
第1天：使用jetoptimus®试剂进行转染
→仅使用jetoptmus®缓冲液
→以60-80%融合率转染细胞
培养皿
w=jetoptimus®缓冲液的体积
x=添加的dna量
y=jetoptimus®体积
96孔
12.5 µl
0.13 µg
0.13-0.19 µl
24孔
50 µl
0.5µg
0.5-0.75 µl
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1µg
1-1.5 µl
6孔/35mm
200 µl
2µg
2-3 µl
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500 µl
4µg
4-6 µl
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10µg
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第2-3天：测量基因表达
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（1）测试不同的dna量：x、0.5 x和1.5 x。
（2）测试不同的dna/jetoptimus®比例，1:1至1:1.5。
（3）有关细胞特异性协议，请联系益元利康客服获取。
培养皿
w=jetoptimus®缓冲液的体积
x=添加的dna量
y=jetoptimus®体积
96孔
12.5 µl
0.10-0.20 µg
0.10-0.30 µl
24孔
50 µl
0.25-0.75 µg
0.25-1 µl
12孔
100 µl
0.5-1.5 µg
0.5-2.25 µl
6孔/35mm
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1-3 µg
1-4.5 µl
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（4）在敏感细胞的还原血清培养基中进行转染。
（5）检查靶基因是否影响细胞活力。
（6）确保细胞在转染前已传代两次以上且少于20次。
（7）丢弃过度培养的细胞。
良好的dna转染实践：
（1）适当储存jetoptimus®（5±3°c）。
（2）定期检查支原体污染情况。
（3）使用报告基因来建立和优化转染条件。
（4）血清质量可能严重影响转染效率。购买新一批血清时或胰蛋白酶检查细胞活力以及转染效率。
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