犬elisa检测试剂盒操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μl;
3.样本孔中加入待测样本50μl;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(hrp)标记的检测抗体100μl,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μl),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μl,15min内,在450nm波长处测定各孔的od值。
犬elisa检测试剂盒注意事项:
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
2、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
3、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本od值大于标准品孔的od值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5、底物请避光保存。
6、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
7、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8、本试剂不同批号组分不得混用。
9、如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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