细胞:htert-hpne细胞
中文名称:人胰腺导管上皮细胞
生长特性:贴壁
培养基:1640培养基 血清:10%fbs(gibco胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% fbs、10% dmso
细胞传代:
1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,pbs缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25%yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。
2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。
3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4):注意培养基ph值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
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哺乳动物细胞核的各个组成部分,都不是随机排列的,它们的排列模式可以用统计学方法测量,这种发现有助于研究细胞的运作机制,对癌症等疾病中,细胞核功能障碍进行解释。
发现支配一种重要控制蛋白在细胞核内分布的空间相关性,与哺乳动物细胞核内其它成分相关。cbp蛋白分布广泛,作用于细胞核内的特定基因,并控制这些基因在细胞周期的特定时间内表现。
利用荧光染剂对细胞核内的成分进行标记,以鉴定cbp浓缩区(concentrated pocket)。在显微镜下观察到的,是一个非常复杂的模式。
接下来,对细胞核组成分中最近的邻居之距离进行测量,研制出一种工具,可以针对核内可能与cpb有关的其它蛋白、基因域进行测定.
还研制出一种模型,可用来分析更易定位于cbp袋附近的成分,最后得到了由cpb浓缩定位驱动的细胞核组分定位的细胞核图谱。
之所以选择cpb,是因为cpb是一个研究相当透彻的基因调节剂,它可以改变作用基因的部分结构而启动基因并表现特殊蛋白。
利用荧光染料和成熟的影像技术,发现cpb区更倾向于定位在其作用的基因域附近。
关键词:培养箱 显微镜
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