小鼠胚胎成纤维细胞传代培养:一、原理
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。二、材料和试剂
1、细胞:贴壁细胞株
2、试剂:0.25%、1640培养基(含10%小牛血清)
3、仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等 三、操作步骤
1、将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。
2、加入0.5—1ml 0.25%溶液,使瓶底细胞都浸入溶液中。
3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移,原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时将弃去,加入10ml培养液终止消化。观察消化也可以用肉眼,当见到瓶底发白并出现细针孔空隙时终止消化。一般室温消化时间约为1—3分钟。
4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液,分到另外两到三瓶中,实践培养液塞好橡皮塞,置37℃下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。
附:消化液配制方法:称取0.25克蛋白酶(活力为1:250),加入100ml无ca2+、mg2+的hank’s液溶解,滤器过滤除菌,4℃保存,用前可在37℃下回温。溶液中也可加入edta,使zui终浓度达0.02%。
关键词:倒置显微镜 培养箱
浅析安装、单极H型滑触线注意事项
美森快船和普通快船的区别
1800℃红外加热马弗炉
一般原产地证及其作用
十月份北美集装箱进口激增20%
小鼠胚胎成纤维细胞传代培养
空运货物查询网官网(国际空运运单号查询网站大全)
物流货运网哪家好(货运物流平台网怎么样)
美国FBA是什么,FBA怎么操作?
三个点来介绍如何维护德国STEIMEL离心泵
氮吹仪发生漏气现象该怎么办
食用农产品合格证农药残留检测一体机是做什么的
亚马逊卖家选品时应该重点考虑哪些方面?
自建海外仓储的流程和注意事项
海外仓的跨境电商(跨境电商海外仓合作)
什么是太阳能电池测试?
车削中心的工作原理和应用介绍
跨境电商B2B与B2C比较实质差异有哪些?
地埋式一体化污水提升泵站重要组成部分
模具高速铣削加工技术