母种培养基的种类

​母种培养基的种类
母种培养基的种类
母种是菌种生产的关键,要求纯度高,不能混生杂菌,同时母种的菌丝体较为纤细,分解培养料的能力较弱。因此,母种菌丝体需要培养在营养丰富,易被吸收,表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。适合母种菌丝生长的琼脂培养基种类很多,常用的有下列几种:
(1)马铃薯—葡萄糖—琼脂培养基
马铃薯(去皮) 200克 琼脂 20克 葡萄糖(或蔗糖) 20克 水 1000毫升
(2)麦芽汁—葡萄糖—琼脂培养基
干麦芽 250克 琼脂 15~20克 葡萄糖(或蔗糖) 10克 水 1000毫升
(3)胡萝卜—葡萄糖—琼脂培养基
胡萝卜100克 琼脂 20克 葡萄糖(或蔗糖)20克 水1000毫升
(4)蘑菇汁—葡萄糖一琼脂培养基(适用于蘑菇) 鲜蘑菇 250克 琼脂 20克 葡萄糖(或蔗糖) 20克 水 1000毫升
(5) 蛋白胨—葡萄糖—琼脂培养基
蛋白胨 2克 葡萄糖 20克 2克 1(硫胺素) 0.5毫克 磷酸二氢钾 0.5克 琼脂 18克 0.5克 水 l000毫升
2.母种培养基的制法
以的马铃薯—葡萄糖—琼脂培养基的制法为例介绍如下:
先将马铃薯去皮,洗涤,切成小块加水1000毫升,煮沸15~20分钟,取双层纱布过滤,取其滤液,加入琼脂和葡萄糖(或蔗糖),用文火加热使其溶化,最后补足水分,使其容量仍为1000毫升。趁热分装于试管中,装量约为试管长度的1/5左右,装管时要注意不使培养基沾污试管壁和试管口。试管口塞上大小合适的棉花塞,塞入试管口内的长度为棉塞总长的3/5。塞好棉塞后,每10支作一捆,用牛皮纸包扎好后,臵铁丝网笼中,然后进行高压 灭菌。
如作为孢子分离用,则将培养基分装于三角瓶或培养皿中,然后高压灭菌。
3.母种培养基的消毒灭菌:
母种培养基通常用高压蒸汽灭菌锅来消毒灭菌,常用的高压蒸汽灭菌锅有直式、卧式和手提式三种。将配制好后的母种培养基移入上述任何一种高压蒸汽灭菌锅中,在15公斤/平方厘米压力下,灭菌30分钟。
高压蒸汽灭菌主要是依靠提高蒸汽的温度来灭菌的,因此灭菌时,应将锅内的冷空气全部排除。否则,尽管压力表上的压力已达到要求,然而,灭菌锅内的温度却未达到所需的温度。排除冷空气的方法是加热后当压力表上指针上升到0.5公斤/平方厘米时,打开排气阀,放气至指针仍回到“零”的位臵。灭菌的时间是以排除冷空气后,压力回升到1.5公斤/平方厘米时才开始计算。每次灭菌之后,要等压力降到“零”时,才打开锅盖,否则,灭菌的液体会因突然减压而外溢,玻璃器皿也会因突然降温而破裂。
高压灭菌后将试管取出排成斜面备用。
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