polyplus jetPRIME®转染试剂说明书
第0天：细胞接种
→根据下表在v ml细胞生长培养基中培养种子细胞
每个孔、盘子或烧瓶的数量
*对于特定的细胞类型或悬浮细胞，请参考完整的方案。
第1天：转染
→在血清存在的情况下进行转染
→仅使用jetprime®缓冲液
→以60-80%的融合率转染细胞
每个孔、盘子或烧瓶的数量
第2-3天：测量基因表达
优化方向：
(1)测试不同的dna量：x、0.5x和1.5x。
(2)测试不同的dna/jetprime®比例，1:2至1:3。
每个孔、盘子或烧瓶的数量
对于hek-293和hela细胞，可以将dna量减少到0.5倍，并使用1:2 dna/jetprime®比例。
提高敏感细胞细胞活力的技巧：
（1）转染后4小时更换培养基。
（2）将dna量减少到0.5倍，同时保持之前使用的dna/jetprime®比例。
（3）在较早的时间点（例如转染后24小时而不是48小时）分析转染。
（4）检查靶基因是否影响细胞活力。
良好的dna转染实践：
（1）适当储存jetprime®（5±3°c）。
（2）确保细胞在转染前传代两次以上且少于20次。
（3）丢弃过度流畅的细胞。
（4）定期检查支原体污染情况。
（5）使用报告基因来建立和优化转染条件。
（6）血清质量可能会严重影响转染效率。购买新一批血清时或胰蛋白酶检查细胞活力以及转染效率。
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（4）检查靶基因是否影响细胞活力。
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