阿留申病病毒探针法荧光PCR检测试剂盒样品RNA的抽提
阿留申病病毒探针法荧光pcr检测试剂盒样品rna的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的trizol试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。rna全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的trizol试剂的60%。③rna沉淀 将水相上层转移到一干净无rna酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的rna，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的rna沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④rna清洗 移去上清液，每1mltrizol试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用depch2o配制），清洗rna沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤rna干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使rna沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解rna沉淀 溶解rna时，先加入无rna酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的rna溶液保存于-80℃待用。
2 rna质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的te溶液将分光光度计调零。然后取少量rna溶液用te稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定rna溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
a260下读值为1表示40 g rna/ml。样品rna浓度(g/ml)计算公式为：a260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
alpha 1 fetoprotein甲胎蛋白抗体
atm毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
abcf2atp结合盒转运蛋白2抗体
ablim3肌动蛋白结合蛋白lim蛋白3抗体
acidic calponin酸性钙调蛋白3抗体
phospho-adam17 (thr735)磷酸化cd156b抗体
adh5乙醇脱氢酶5抗体
adh6乙醇脱氢酶6抗体
agpat5溶血磷脂酰基转移酶5抗体
aipl1遗传性失明相关蛋白aipl1抗体
aire免疫调节蛋白aire抗体
phospho-akt1 (ser473)磷酸化蛋白激酶akt1抗体
phospho-akt1 (thr72)磷酸化蛋白激酶akt1抗体
phospho-akt1 (tyr326)磷酸化蛋白激酶akt1抗体
aldh1a2乙醛脱氢酶2型抗体
aldh9a1γ-氨基丁酸醛脱氢酶抗体
agps衰老相关蛋白5抗体
phospho-alpha b crystallin (ser59)磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体
ambn釉基质蛋白抗体
phospho-ampk alpha 2 (ser176)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
phospho-ampk alpha 2 (ser491)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
phospho-androgen receptor (ser515)磷酸化雄激素受体抗体
phospho-androgen receptor (ser791)磷酸化雄激素受体抗体
phospho-androgen receptor (ser94)磷酸化雄激素受体抗体
关键词：分光光度计
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②两相分离 每1ml的trizol试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。rna全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的trizol试剂的60%。③rna沉淀 将水相上层转移到一干净无rna酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的rna，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的rna沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④rna清洗 移去上清液，每1mltrizol试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用depch2o配制），清洗rna沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤rna干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使rna沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解rna沉淀 溶解rna时，先加入无rna酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的rna溶液保存于-80℃待用。
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① 浓度测定
a260下读值为1表示40 g rna/ml。样品rna浓度(g/ml)计算公式为：a260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
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