安捷伦液相色谱仪以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。
安捷伦液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
安捷伦液相色谱仪流动相是通过色谱柱填料和流动相之间的质量交换来分离样品成分,因此要求流动相具有以下特征:
1、纯度要求流动相应使用hplc级试剂,使用前应过滤除去颗粒杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。溶剂中的杂质会积聚在色谱柱上,这会影响色谱柱的使用寿命。
2、样品的溶解度应适当。如果溶解度不好,样品会沉淀在柱头上,这不仅影响纯化和分离,还会缩短柱子的使用寿命。
3、低粘度(应小于2cp)高粘度溶剂会影响溶质的扩散和传质,降低柱效,增加柱压降并延长分离时间。选择是沸点低于100℃的流动相。
4、样品易于回收。应使用挥发性溶剂。
5、要求流动相ph使用反相色谱法分离弱酸(3≤pka≤7)或弱碱(7≤pka≤8)样品。
主要应用于:
1、药物分析:如天然产物中复杂组分的分析。
2、生化分析:如蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品。
3、食品分析:如食品中农药残留的检测。
4、环境分析:如水中微囊藻毒素的检测。
5、其他:如化妆品中违禁品的检测。
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