凝血酶是由大小分别为31kd和6kd的两条肽链通过二硫键组成的一种丝氨酸蛋白水解酶,可从动物血浆中利用已激活凝血酶原水解制得,可催化纤维蛋白原(flbrinogen)水解释放a肽和b肽,由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块,常用于诊断学中凝血化验、凝血因子检测、血液或血浆的脱纤维化等;另外,由于凝血酶切割序列专一,水解效率高,因此在分子生物学、生物化学或生物工程制药研究中也常作为工具酶用于重组融合蛋白(包含凝血酶识别位点)的特异性断裂。
牛凝血酶(>2000iu/mg)凝血酶(thrombin)来源于牛血浆,分子量37kd,是由两条肽链(31kd和6kd)通过二硫键组成的。
艾美捷牛凝血酶(>2000iu/mg):
目录号:a-csh002
尺寸:1000u
储存:2-8°c(36个月)
分子量:37 kda
外观:白色冻干粉或固体块
比活度:≥2000 |u/mg
纯度:sds-page分析中未观察到杂质带
ph(25℃):5.0~6.0
牛凝血酶(>2000iu/mg)用法:
这种凝血酶是一种广泛应用的蛋白酶,可用于切割标签,并且可以高效地切割质量比低至1:2000的蛋白质。在20°c至37°c的温度范围内,切割时间为0.3至16小时。凝血酶的最佳切割位点是x4-x3-p-r[k]-x1'-x2',其中x4和x3是疏水性氨基酸,x1'和x2'是非酸性氨基酸。一些常用的识别位点包括l-v-p-r-g-s、l-v-p-r-g-f和m-y-p-r-g-n。x4-x3-p-r-g-x2'之间的切割比x4-x3-p-k-l-x2'更有效。另一个识别位点是x2-r[k]-x1',其中x2或x1'是甘氨酸,比如a-r-g和g-k-a,切割发生在第二个残基之后。在凝血酶切割位点和n-末端标签之间插入五个甘氨酸残基可以改善切割效果。这种甘氨酸连接肽可使完-全切割所需的酶量减少,并且还可以防止潜在的错误切割。有效的消化缓冲液是含有20 mm tris-hcl缓冲液和150 mm氯化钠的ph 8.0的溶液。可以使用对氨基苯甲酰亚胺亲和纯化、苯甲酰亚胺亲和纯化或肝素亲和纯化去除切割产物中的凝血酶。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。
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