(1)电解质:抗原和抗体通常为蛋白质分子,等电点分别为ph 3~5和ph 5~6,在中性或:弱碱性的环境中,表面均带负电荷,适当浓度的电解质会使他们失去一部分负电荷而相互结合,出现肉眼可见的凝集或沉淀现象:在抗原抗体反应中,常用0.85%的naci溶液或各种缓冲液作为抗原、抗体的稀释液,以提供适当浓度的电解质。
(2)温度:抗原抗体反应必须在适宜的温度中进行,一般为15~40℃,通常最适为37℃。一定范围内,温度升高,可促进抗原抗体分子问的碰撞机会,加速抗原抗体复合物的形成,加快可见反应的速度,若温度高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或破坏;温度越低,结合速度越慢,但结合牢固,易于观察。某些特殊的抗原抗体反应,对反应温度有特殊要求,如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好,20℃以上反而解离。
(3)酸碱度:抗原抗体反应必须在合适的酸碱度环境中进行,ph过高或过低都将影响抗原:抗体的理化性质,抗原抗体反应的最适酸碱度为ph 6~8。此外,当ph达到或接近颗粒性抗原的等电点时,即使没有相应抗体存在时,也会引起抗原非特异性凝集,即自凝,造成假阳性反应,严重影响试验的可靠性 。
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