用高分离度快速液相色谱对三七进行快速
摘要本应用报告报道了：• 高分离度快速液相色谱（rrlc）分析三七方法的方法建立• 从常规hplc到rrlc方法转换的结果• 用rrlc方法在保持复杂组分良好分离度的同时，缩短了分析时间，同时提高了样品通量、降低了成本• 用优化方法得到的色谱图显示，从三七不同部位得到的样品色谱峰轮廓不同，某些皂甙的浓度也不同
前言中药（tcms）具有悠久的用药历史，其疗效在中国及韩国、日本等亚洲国家都得到认可。在西方国家，也越来越普遍地将中药作为食品添加剂或营养补剂。被使用过的中药已经有11,000多种。对中药的研究和质量控制很大程度上依靠仪器分离和分析的性能。本研究建立了一种分析三七的高分离度快速液相色谱(rrlc)方法。用安捷伦方法转移器轻松地将常规hplc 分析方法转为 rrlc 方法。用不同提取方法从三七植物的不同部位制备不同样品 。用优化的方法分离这些样品，得到的色谱图显示了不同的色谱峰轮廓。本应用报告还报道了定量结果。质控部门使用本研究中建立的更快、更好的方法，将缩短分析时间，提高样品通量。使用这些方法还能节省溶剂消耗，改善整个分析过程。三七，中文名三七或田七，在中国是一种重要而昂贵的药材。它已经有400多年的栽培历史，85%以上的三七都产自中国云南省。三七的功效在于促进血液循环、去除血液瘀积包括凝血，治疗肿胀、缓解疼痛。最近的药理学研究显示，三七具有抗癌和保肝作用，如，对心血管和脑血管系统有保护作用1。三七的皂甙种类与著名的人参和西洋参 (花旗参)相似，因为它们都属于同一种属。三七主要用于中国南方的不同验方。著名的中成药白药也含有三七。中药的复杂基质常常给质量控制和研究带来挑战。2005版中国药典收载了药材三七及其复方制剂，如伤药片，其中含有三七皂甙r1，是这些制剂中必须分析的成分。三七皂甙的分析时间一般是 60 多分钟。随着对中药的研究越来越深入，科学家们认为只控制1到2个成分还不足以确定中药的质量，必须开发分离更多组分的质量控制方法。像中药这种复杂样品的分离比合成药物的分离需要更长的分析时间。当需要考虑样品通量问题时，理想的解决方案就是在较短的分析时间内达到相似或更高的性能。使用rrlc有可能开发出分析时间更短、性能更好，又节省溶剂的方法。对于生产质量控制来说，使用rrlc意味着产品批次的检定出厂可以比使用常规hplc方法更快。
实验仪器用于开发 rrlc 方法的 agilent1200系列高分离度快速液相色谱系统包含以下组件：agilent 1200系列 rrlc系统包括：• agilent 1200 系列sl型二元泵，带真空脱气机• agilent 1200系列sl型高性能自动进样器• agilent 1200 系列sl型柱温箱• agilent 1200 系列sl型二极管阵列检测器，配置微量流通池(2 µl体积，3 mm光程)• agilent 化学工作站 b.02.01sr1，用于数据采集和分析• agilent zorbax xdb c18 rrht色谱柱，4.6 x 50 mm, 1.8 µm粒径常规hplc为标准配置agilent 1100系列液相色谱，包含以下组件：• agilent 1100 系列二元泵，带脱气机• agilent 1100 系列自动进样器• agilent 1100 系列柱温箱• agilent 1100 系列二极管阵列检测器• agilent zorbax sb c18色谱柱，4.6 x 50 mm, 5 µm粒径
三七皂甙 r1、人参皂甙rg1和人参皂甙rb1标准品购自中国国家药品与生物制品检定所(nicpbp)，人参皂甙re和人参皂甙rc标准品购自美国sigmaaldrich公司。• 三七茎叶提取物(ncle)由用户实验室提供。茎和叶用60%乙醇提取，溶剂蒸干后残渣用正丁醇溶解，再将溶剂挥发掉，残留黄色粉末用甲醇溶解，待进样。3• 三七根提取物（nre）由用户实验室提供。粗品用水提取，用大孔滤膜过滤，滤液挥发至干。残留白色粉末状物质用甲醇溶解，待进样。• 三七购自当地一家药材商店（品牌为同仁堂）。粗品用水/甲醇(30/70, v/v)超声萃取30分钟，用0.22微米滤膜过滤，用澄清的滤液进样。• 水、乙腈和甲醇均购自美国fisher公司。
方法转换需要将使用填充5 µm填料色谱柱的常规hplc方法转换成使用填充1.8 µm填料色谱柱的rrlc方法。使用安捷伦方法转换计算器( 可用光盘，agilent 1200系列高分离度快速液相色谱系统，发行号5989-5130en)，可使这一过程简便、快速(图1)。方法转换计算器上列出了各种不同参数，可以根据具体需求对转换后的方法进一步改进。如需了解如何将一个常规hplc方法手动转换成rrlc方法，请参阅安捷伦相关应用报告2,3,4。
结果与讨论色谱图药理学研究结果显示，三七植物的不同部位因所含的成分不同具有不同的药效。使用特殊的提取方法以达到获得更多有效成分的目的。用常规hplc方法和rrlc方法分析三七样品得到不同的峰轮廓。图2显示了用常规hplc方法分析三七茎和叶提取物(ncle)得到的色谱图。这种分析通常需要60多分钟5。如实验部分所述，用于分析三七样品的rrlc方法是在常规hplc方法的基础上开发的。用常规hplc方法和 rrlc 方法分析了相同的ncle样品。色谱图见图2和图3。图 3 中的色谱峰比图 2 中的更窄。这意味着分离复杂样品的峰容量增加了。rrlc分析的分离度或分离性能优于常规hplc。同时，分析时间从60分钟明显缩短到20分钟。另一个要考虑的因素是常规hplc和 rrlc 柱的选择性应保持一致。如果新的rrlc柱与常规hplc柱相比具有不同的选择性，方法转换将失去意义。在本研究中，峰轮廓和洗脱顺序都相同，所以不需要再对新色谱图中的峰进行鉴定。而且，二极管阵列检测器得到的uv 光谱图将有助于进一步对色谱峰进行确证。
关键词：脱气机 柱温箱 数据采集 色谱柱
填料密封的故障与排除方法
300mm开启式管式炉参数及安全性能
水泥养护槽规格
1.4462机械性能？
贴标机是后段包装的重要工序
用高分离度快速液相色谱对三七进行快速
立式加工中心手动连续进给操作
可调式铬钼钢减压阀
纸板克重测定的取样器具介绍
盐雾试验的种类与应用范围
电力变压器保护设计
冻干机在鹿血粉应用的冻干工艺
「优等生」实验室发酵罐密封升级，破解行业难题！
Euchner安全开关功能
云浮膨胀型防火包全国的厂家
实验台上洒到强酸强碱该怎么处理?
倒棱机的四大特点
本特利benty传感器的特点
双螺杆猫粮膨化加工生产线设备的用途以及特点介绍
电力电缆故障测试仪厂家简单介绍我国的电网发
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实验仪器用于开发 rrlc 方法的 agilent1200系列高分离度快速液相色谱系统包含以下组件：agilent 1200系列 rrlc系统包括：• agilent 1200 系列sl型二元泵，带真空脱气机• agilent 1200系列sl型高性能自动进样器• agilent 1200 系列sl型柱温箱• agilent 1200 系列sl型二极管阵列检测器，配置微量流通池(2 µl体积，3 mm光程)• agilent 化学工作站 b.02.01sr1，用于数据采集和分析• agilent zorbax xdb c18 rrht色谱柱，4.6 x 50 mm, 1.8 µm粒径常规hplc为标准配置agilent 1100系列液相色谱，包含以下组件：• agilent 1100 系列二元泵，带脱气机• agilent 1100 系列自动进样器• agilent 1100 系列柱温箱• agilent 1100 系列二极管阵列检测器• agilent zorbax sb c18色谱柱，4.6 x 50 mm, 5 µm粒径
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结果与讨论色谱图药理学研究结果显示，三七植物的不同部位因所含的成分不同具有不同的药效。使用特殊的提取方法以达到获得更多有效成分的目的。用常规hplc方法和rrlc方法分析三七样品得到不同的峰轮廓。图2显示了用常规hplc方法分析三七茎和叶提取物(ncle)得到的色谱图。这种分析通常需要60多分钟5。如实验部分所述，用于分析三七样品的rrlc方法是在常规hplc方法的基础上开发的。用常规hplc方法和 rrlc 方法分析了相同的ncle样品。色谱图见图2和图3。图 3 中的色谱峰比图 2 中的更窄。这意味着分离复杂样品的峰容量增加了。rrlc分析的分离度或分离性能优于常规hplc。同时，分析时间从60分钟明显缩短到20分钟。另一个要考虑的因素是常规hplc和 rrlc 柱的选择性应保持一致。如果新的rrlc柱与常规hplc柱相比具有不同的选择性，方法转换将失去意义。在本研究中，峰轮廓和洗脱顺序都相同，所以不需要再对新色谱图中的峰进行鉴定。而且，二极管阵列检测器得到的uv 光谱图将有助于进一步对色谱峰进行确证。
关键词：脱气机 柱温箱 数据采集 色谱柱
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