细胞是否受到细菌污染，可以早知道
许多时候，都需要无菌环境，无菌培养。例如细胞在体外培养时，为了保证无菌，有时需要加入抗生素。但*加抗生素对细胞也不利。一些特殊实验也需要不含抗生素。有没有一种方法，可提早知道细胞是否有细菌污染呢？
有些客户采用了德国minerva biolabs生产的细菌检测试剂盒（英文名：onar® bacteria detection kit，货号），它是pcr方法，可快速检测生物样品（包括细胞培养物和病毒贮存液）中是否存在细菌。该试剂盒引物针对细菌16s rrna的高保守区,，可检测超过45种细菌属。
该试剂盒中的主要试剂均为冻干粉，性能稳定。它包含有：
冻干预混液：含引物/核苷酸/内控对照dna /聚合酶
反应缓冲液
冻干的阳性对照dna
pcr级水
样本可以是细胞上清，样本不用提dna，但需要热灭活（95 °c 5分钟）。
样本需不含抗生素。如含抗生素，则细胞应在不含抗生素的培养基中再培养至少一代。
细菌阳性扩增片段450 bp左右，内控对照扩增片段约140bp。
该试剂盒的检测限为2.4×10的3次方细菌 /ml。
为避免假阳性，建议使用带滤芯吸头。
扩增后跑胶观察条带，即可判断结果。示意图如下：
图. 内控对照显示pcr反应正常，样本中无pcr抑制成分。460bp左右存在目的条带，提示存在细菌污染。
该产品有2篇引用文献，如下：
1. linow m., (2012). mastermix 16s – ultra sensitive detection of microbial dna. research in molecular diagnostics, no. 2/12.
2. simonsen ø. et al., (2015). characterization of the exte nt of a large outbreak of legionnaires‘ disease by serological assays. bmc infectious diseases, 15:163. doi: 10.1186/s12879-015-0903-2.
感谢缔一生物提供相关内容。
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