紫外分光光度计的使用方法

紫外分光光度计是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。紫外分光光度计的使用方法如下:
1开机
打开样品室盖,检查样品室中是否放置遮光物,若有取出。打开电源开关,仪器进入预热状态,预热20min。
2选择光源
(此操作适用于紫外-可见分光光度计)
电源开关打开后,钨灯即亮;若仪器需要在紫外光区(200nm~290nm)工作,则需将光源切换至氘灯;若仪器需要在紫外光区(290nm~360nm)工作,则要同时点亮氘灯和钨灯。
3选择波长
调节波长旋钮或输入实验所需的波长,选择须用的单色光波长。
4校准
目前型号较新的分光光度计具有开机自动校准功能,无自动校准功能的设备使用前需参照使用说明书手动校准。
5测量
如试验方法中无特别规定,通常使用装有蒸馏水的吸收池调零后放入样品和参比样进行测试,并记录测试结果。
6数据处理
定量测试时通常需要先测定若干个已知浓度的待测物标准样品,根据其吸光值与浓度绘制标准曲线。目前新型号的紫外分光光度计本身都有制作和计算标准曲线的功能,具体操作方式可参照设备使用说明。不具备标准曲线绘制功能的设备,可利用excel软件或坐标纸辅助绘制。
7关机
测量完毕,取出吸收池,清洗并晾干后入盒保存。关闭电源,拔下电源插头,在样品室内放入干燥剂,盖上样品室盖,罩上防尘罩。

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