1-磷酸鞘氨醇检测试剂盒操作步骤
1-磷酸鞘氨醇检测试剂盒操作步骤:
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μl；待测样本孔中先加入待测样本10μl，再加样本稀释液40μl(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μl，空白对照孔不加。
7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
9、显色：每孔先加入显色剂a 液50μl，再加入显色剂b液 50μl，平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s)，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值(od值)。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的od值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的od值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
人可溶性血管内皮生长因子受体2(vegfr-2/sflk-1)elisa kit
人胸腺基质淋巴细胞生成素(tslp)elisa kit
人穿孔素/成孔蛋白(pf/pfp)elisa kit
人多效生长因子(ptn)elisa kit
人可溶性cd28(scd28)elisa kit
人淋巴细胞因子elisa kit
人胸腺活化调节趋化因子(tarc/ccl17)elisa kit
人神经细胞粘附分子配体1(ncam-l1/cd171)elisa kit
人神经保护因子(cvnpf)elisa kit
人可溶性肿瘤坏死因子α受体(stnfαr)elisa kit
人可溶性细胞因子受体(sckr)elisa kit
人可溶性凋亡相关因子配体(sfasl)elisa kit
人细胞凋亡抑制因子(iap)elisa kit
人集落刺激因子(csf)elisa kit
人γ干扰素诱导单核细胞因子(migf/cxcl9)elisa kit
人干扰素诱导t细胞趋化因子(itac/cxcl11)elisa kit
人cd14分子(cdl4)elisa kit
人凋亡诱导因子(aif)elisa kit
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人cd4分子(cd4)elisa kit
人p钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(p-cad)elisa kit
人角化细胞生长因子(kgf)elisa kit
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3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μl；待测样本孔中先加入待测样本10μl，再加样本稀释液40μl(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μl，空白对照孔不加。
7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
9、显色：每孔先加入显色剂a 液50μl，再加入显色剂b液 50μl，平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s)，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值(od值)。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的od值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的od值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
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