细胞培养背景有“颗粒”？全面解析！
近期很多老师发图咨询细胞培养时背景的“颗粒”是不是污染，如何去除？今天这篇文章小编带大家全面解析细胞培养中出现的“颗粒”问题。细胞培养中常见的“颗粒”可分为胞内和胞外两种，下面两张图可以直观地向大家展示：
很多老师因为不清除这些“颗粒”的来源，害怕污染而将细胞丢弃，不仅浪费心力，还耽误实验进度，接下来我们逐步分析这些“颗粒”产生的原因。
1、细菌或真菌污染
图3 污染的细胞
真菌污染相对来说比较好鉴别，一般肉眼可见培养基上层漂浮的霉斑或显微镜下可见菌体，细菌的菌体相对较小，显微镜下呈棒状、球状或者杆状，由于细菌增值产生酸性物质，短期内培养基变黄，浑浊，细沙状沉淀。
2、细胞碎片
图4 细胞碎片和细菌区别
消化不当或者ph、渗透压、温度的变动可能引起细胞死亡，产生碎片，如何对细菌和细胞碎片辨别？有困难的老师，可以登录爱必信-产品资讯处或者关注爱必信公众号查看往期文章。
3、凋亡小体
图5 程序性死亡未释放和正在释放的凋亡小体
程序性死亡细胞的核dna在核小体连接处断裂成核小体片段，形成浓缩的染色质块。随着染色质不断聚集，核膜在核孔处断裂，形成核碎片。同时由于不断脱水，细胞质不断浓缩，细胞体积减小。整个细胞通过发芽、起泡等方式形成一个球形的突起，并在其根部绞窄而脱落形成一些大小不等，内含胞质、细胞器及核碎片的小体称为凋亡小体。
4、支原体集落
支原体无细胞壁，直径为0.1-0.3μm，且形态易变，极易通过除菌过滤器，单个的支原体无法显微镜观察，目前已知的主要污染源是动物血清、胰酶和已污染培养物的气溶胶。来源广泛、不易过滤、难以观察，给细胞培养带来了极大隐患。单个的支原体无法从显微镜下观察，支原体集落却可以被捕捉到。
图6 被支原体集落“附身”的细胞
5、黑胶虫
谈到黑胶虫，大家应该都对他神秘的“身世”有印象，目前多数黑胶虫被鉴定为细菌，黑胶虫明显的特征是运动，但是这里小编要提醒大家，支原体集落，可能也会出现运动的现象，详细的讲述可以查看往期文章。
视频 颤动的黑胶虫
6、血清中的物质
血清反复冻融或者经过灭活后，可能会产生“小黑点”，此外不要认为会增多的一定是微生物污染，血清质量不好，影响细胞生长，衰老细胞增多形成细胞碎片，也会呈现细胞长势不佳，黑点增多的现象。
经过分析，许多老师肯定又觉得混乱，细胞培养遇到“颗粒”到底如何应对？
首先，如果是微生物污染，不重要或者可替代的细胞，我们都建议丢弃，并排查污染来源，被污染的试剂也要丢弃，并且对使用的仪器和环境进行除菌，比较重要的细胞，可以用含抗生素的缓冲液清洗过后，使用含较高浓度双抗或三抗培养，尝试消除，对于支原体和黑胶虫污染，使用相应的支原体清除剂和黑胶虫清除剂进行处理。
图7 爱必信污染清除系列产品
其他情况我们建议优先排查血清质量，特别是更换血清批次的，选择质量好的血清也是细胞培养成功与否的关键所在，除非实验特殊要求，其他情况下，不建议对血清进行灭活处理。而细胞正常凋亡产生的碎片，可以低俗离心分离完整细胞和细胞碎片，参考条件为300-500rpm 3min，根据实际情况进行调整，可以用缓冲液清洗几次。
图8 爱必信胎牛血清
最后需要注意的是某些细胞正常培养过程中会出现一些“颗粒”物质，属于正常现象，老师们一定要多查阅资料，熟悉培养细胞的特性。
本期就讲到这里了，欢迎公众号后台留言，一起探讨细胞培养问题。
胞胞巴适本期好物推荐：
货号
产品名称
规格
abs972
胎牛血清(优级)
500ml
abs981
胎牛血清（特级）
500ml
abs974
胎牛血清(标准级)
500ml
abs47047375
胰蛋白酶-edta消化液(0.25%)，不含酚红
100ml
abs47014935
细胞消化液（干细胞级别）
100ml
abs9244
青霉素-链霉素溶液(100×双抗)
100ml
abs9245
青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗)
100ml
abs9246
青霉素-链霉素-两性霉素b混合溶液(100×三抗)
100ml
abs9371
水浴锅抑菌剂
100ml
abs9372
培养箱除菌剂
480ml
abs9373
细胞房除菌剂
480ml
abs9374
水盘抑菌剂
20ml
abs9253
支原体清除试剂
20mg
abs9254
支原体清除试剂plus
10mg
abs9375
支原体清除剂
200ul
abs9376
支原体预防剂
500ul
abs9648
黑胶虫清除剂
200ul
* 本文图片来自网络，仅供学习参考用
好消息！absin文献奖励重磅升级！
absin特色产品线：
wb相关：ecl发光液、预染marker、预制胶；ihc相关：二抗试剂盒、组化笔；ip/coip试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、bsa、蛋白酶k、ctb、ttx、cee；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；elisa试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
大型防腐管道木托质量
一文为您介绍长轴深井消防泵的基础知识
龙兴教您如何选择搅拌设备
创测科技提供大型药品稳定性试验箱|出售大型药品稳定性试验箱
钢结构涂料厚度与耐火极限的关系
细胞培养背景有“颗粒”？全面解析！
高压三管高压旋喷桩机的优点
立式搅拌球磨机的特点和安装事项分别是什么？
可以有效的清除杀菌锅设备中的水垢的方法
市场监管总局印发《关于全面深化长三角计量一体化发展的意见》
预算1075万 杭州市食品药品检验研究院采购质谱仪等
浅析旋涡气泵的3大优点
ATOS比例阀我们常用有那几种
玻璃瓶饮料生产线优点和系统配置
婴儿秤-新生儿体重的简单明了测量方法
什么是快走丝数控线切割机床呢？
造粒机的选购
1830万 有研(广东)新材料技术研究院动力电池测试验证中心2023年(第一批)设备采购项目公开招标
电杆底座法兰毛坯的用途
共享单车乱象如何治？各方力量在集结
很多老师因为不清除这些“颗粒”的来源，害怕污染而将细胞丢弃，不仅浪费心力，还耽误实验进度，接下来我们逐步分析这些“颗粒”产生的原因。
1、细菌或真菌污染
图3 污染的细胞
真菌污染相对来说比较好鉴别，一般肉眼可见培养基上层漂浮的霉斑或显微镜下可见菌体，细菌的菌体相对较小，显微镜下呈棒状、球状或者杆状，由于细菌增值产生酸性物质，短期内培养基变黄，浑浊，细沙状沉淀。
2、细胞碎片
图4 细胞碎片和细菌区别
消化不当或者ph、渗透压、温度的变动可能引起细胞死亡，产生碎片，如何对细菌和细胞碎片辨别？有困难的老师，可以登录爱必信-产品资讯处或者关注爱必信公众号查看往期文章。
3、凋亡小体
图5 程序性死亡未释放和正在释放的凋亡小体
程序性死亡细胞的核dna在核小体连接处断裂成核小体片段，形成浓缩的染色质块。随着染色质不断聚集，核膜在核孔处断裂，形成核碎片。同时由于不断脱水，细胞质不断浓缩，细胞体积减小。整个细胞通过发芽、起泡等方式形成一个球形的突起，并在其根部绞窄而脱落形成一些大小不等，内含胞质、细胞器及核碎片的小体称为凋亡小体。
4、支原体集落
支原体无细胞壁，直径为0.1-0.3μm，且形态易变，极易通过除菌过滤器，单个的支原体无法显微镜观察，目前已知的主要污染源是动物血清、胰酶和已污染培养物的气溶胶。来源广泛、不易过滤、难以观察，给细胞培养带来了极大隐患。单个的支原体无法从显微镜下观察，支原体集落却可以被捕捉到。
图6 被支原体集落“附身”的细胞
5、黑胶虫
谈到黑胶虫，大家应该都对他神秘的“身世”有印象，目前多数黑胶虫被鉴定为细菌，黑胶虫明显的特征是运动，但是这里小编要提醒大家，支原体集落，可能也会出现运动的现象，详细的讲述可以查看往期文章。
视频 颤动的黑胶虫
6、血清中的物质
血清反复冻融或者经过灭活后，可能会产生“小黑点”，此外不要认为会增多的一定是微生物污染，血清质量不好，影响细胞生长，衰老细胞增多形成细胞碎片，也会呈现细胞长势不佳，黑点增多的现象。
经过分析，许多老师肯定又觉得混乱，细胞培养遇到“颗粒”到底如何应对？
首先，如果是微生物污染，不重要或者可替代的细胞，我们都建议丢弃，并排查污染来源，被污染的试剂也要丢弃，并且对使用的仪器和环境进行除菌，比较重要的细胞，可以用含抗生素的缓冲液清洗过后，使用含较高浓度双抗或三抗培养，尝试消除，对于支原体和黑胶虫污染，使用相应的支原体清除剂和黑胶虫清除剂进行处理。
图7 爱必信污染清除系列产品
其他情况我们建议优先排查血清质量，特别是更换血清批次的，选择质量好的血清也是细胞培养成功与否的关键所在，除非实验特殊要求，其他情况下，不建议对血清进行灭活处理。而细胞正常凋亡产生的碎片，可以低俗离心分离完整细胞和细胞碎片，参考条件为300-500rpm 3min，根据实际情况进行调整，可以用缓冲液清洗几次。
图8 爱必信胎牛血清
最后需要注意的是某些细胞正常培养过程中会出现一些“颗粒”物质，属于正常现象，老师们一定要多查阅资料，熟悉培养细胞的特性。
本期就讲到这里了，欢迎公众号后台留言，一起探讨细胞培养问题。
胞胞巴适本期好物推荐：
货号
产品名称
规格
abs972
胎牛血清(优级)
500ml
abs981
胎牛血清（特级）
500ml
abs974
胎牛血清(标准级)
500ml
abs47047375
胰蛋白酶-edta消化液(0.25%)，不含酚红
100ml
abs47014935
细胞消化液（干细胞级别）
100ml
abs9244
青霉素-链霉素溶液(100×双抗)
100ml
abs9245
青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗)
100ml
abs9246
青霉素-链霉素-两性霉素b混合溶液(100×三抗)
100ml
abs9371
水浴锅抑菌剂
100ml
abs9372
培养箱除菌剂
480ml
abs9373
细胞房除菌剂
480ml
abs9374
水盘抑菌剂
20ml
abs9253
支原体清除试剂
20mg
abs9254
支原体清除试剂plus
10mg
abs9375
支原体清除剂
200ul
abs9376
支原体预防剂
500ul
abs9648
黑胶虫清除剂
200ul
* 本文图片来自网络，仅供学习参考用
好消息！absin文献奖励重磅升级！
absin特色产品线：
wb相关：ecl发光液、预染marker、预制胶；ihc相关：二抗试剂盒、组化笔；ip/coip试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、bsa、蛋白酶k、ctb、ttx、cee；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；elisa试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
大型防腐管道木托质量
一文为您介绍长轴深井消防泵的基础知识
龙兴教您如何选择搅拌设备
创测科技提供大型药品稳定性试验箱|出售大型药品稳定性试验箱
钢结构涂料厚度与耐火极限的关系
细胞培养背景有“颗粒”？全面解析！
高压三管高压旋喷桩机的优点
立式搅拌球磨机的特点和安装事项分别是什么？
可以有效的清除杀菌锅设备中的水垢的方法
市场监管总局印发《关于全面深化长三角计量一体化发展的意见》
预算1075万 杭州市食品药品检验研究院采购质谱仪等
浅析旋涡气泵的3大优点
ATOS比例阀我们常用有那几种
玻璃瓶饮料生产线优点和系统配置
婴儿秤-新生儿体重的简单明了测量方法
什么是快走丝数控线切割机床呢？
造粒机的选购
1830万 有研(广东)新材料技术研究院动力电池测试验证中心2023年(第一批)设备采购项目公开招标
电杆底座法兰毛坯的用途
共享单车乱象如何治？各方力量在集结