dna在260nm处吸收强烈,od260值为1的溶液相当于大约50μg/ml双链dna,而蛋白质的特征吸收在280nm处,测定dna提取物中260nm处和280nm处的吸收值od260和od280,可大致判断所提取的dna的纯度。od260/od280的值在1.7~1.9之间,说明提纯度较好,低于1.7,说明提取的dna中残留有较多的蛋白质,可用酚、氯仿继续抽提;若大于2.0,说明有rna污染或dna链断裂。提取的dna量可用下式计算:
p=cv
式中,c为dna浓度,单位为μg/ml;v为提取的dna溶液的体积,单位为ml。
如提取的dna样品为2ml,进行od260值测定的检测样品为0.1ml+0.9ml te缓冲液=1ml,dna的稀释倍数=1ml/0.1ml=10倍,od260和od280值分别为0.63和0.35,则:
纯度= od260/od280=1.8。
样品中dna浓度c=50μg/ml * od260 * 稀释倍数=50μg/ml * 0.63 * 10 =315μg/ml
提取得到的dna样品量是:p=315μg/ml * 2ml =0.630mg。
提供了多种型号的可以实现对dna的检测。
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