棒状杆菌培养基的配制
*棒状杆菌培养基的配制：
1）、camp-bap固体培养基的配制：
称取8.92g培养基，溶于200ml蒸馏水中高压灭菌，待冷却至55°c左右加入200ul添加剂a、200ul添加剂b和10ml脱纤维裂解羊血，充分摇匀后倒平板。(添加剂a和b为购买附带)。
2）、skirrow固体培养基的配制：
称取8.5g培养基，溶于200ml蒸馏水中高压灭菌，待冷却至55°c左右加入2ml fbp原液和10ml脱纤维裂解羊血，充分摇匀后倒平板。
fbp原液配置：
分别称取0.5g焦亚硫酸钠、0.5g丙酮酸钠和0.5g*，溶于20ml蒸馏水中，滤膜过滤除菌，放置4°c冰箱可保存一周。
3）、布氏肉汤增菌液的配制：
称取28.1g布氏肉汤粉末，溶解于1000ml蒸馏水中高压灭菌，冷却后备用。
2、增菌培养
宽鳞大孔菌将新鲜食品，如鸡肉，减碎，取5g置于50ml离心管中，加入布氏肉汤至液面覆盖鸡肉样品，拧紧离心管，先在37°c下预增菌4小时，在加入100 ul*（30mg/ml），并颠倒混匀，放置在微需氧培养箱中42°c培养48小时。
3、分离纯化
用接种环沾取增菌液划线于skirrow血平板上，在平板上挑取不溶血、灰色、有光泽、且边缘整齐发亮的菌落在camp-bap平板上纯化，挑取扁平、灰色、像水滴样菌落多次纯化后保存。
4、菌株培养
将纯化的弯曲杆菌单菌落接种到skirrow血平板上，放置在42°c的微需氧环境下培养48小时，观察细菌生长状态。微需氧条件的创造可用微需氧产气袋和密闭培养罐，也可以用微需氧培养箱（三气培养箱）培养。
5、菌株保存方法
挑取单克隆菌株在skirrow固体培养基上平板划线，放置在42°c的微需氧环境下培养48小时，用灭菌棉签从平板上刮下长出的菌落，悬浮在50%甘油的布氏肉汤保种液中，置于-80°c超低温保存。在-20°c冰箱中保存效果较差，存放一周后细菌复苏率即显著下降。此外，保存菌株需要每隔一年重新活化保存一次。
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2）、skirrow固体培养基的配制：
称取8.5g培养基，溶于200ml蒸馏水中高压灭菌，待冷却至55°c左右加入2ml fbp原液和10ml脱纤维裂解羊血，充分摇匀后倒平板。
fbp原液配置：
分别称取0.5g焦亚硫酸钠、0.5g丙酮酸钠和0.5g*，溶于20ml蒸馏水中，滤膜过滤除菌，放置4°c冰箱可保存一周。
3）、布氏肉汤增菌液的配制：
称取28.1g布氏肉汤粉末，溶解于1000ml蒸馏水中高压灭菌，冷却后备用。
2、增菌培养
宽鳞大孔菌将新鲜食品，如鸡肉，减碎，取5g置于50ml离心管中，加入布氏肉汤至液面覆盖鸡肉样品，拧紧离心管，先在37°c下预增菌4小时，在加入100 ul*（30mg/ml），并颠倒混匀，放置在微需氧培养箱中42°c培养48小时。
3、分离纯化
用接种环沾取增菌液划线于skirrow血平板上，在平板上挑取不溶血、灰色、有光泽、且边缘整齐发亮的菌落在camp-bap平板上纯化，挑取扁平、灰色、像水滴样菌落多次纯化后保存。
4、菌株培养
将纯化的弯曲杆菌单菌落接种到skirrow血平板上，放置在42°c的微需氧环境下培养48小时，观察细菌生长状态。微需氧条件的创造可用微需氧产气袋和密闭培养罐，也可以用微需氧培养箱（三气培养箱）培养。
5、菌株保存方法
挑取单克隆菌株在skirrow固体培养基上平板划线，放置在42°c的微需氧环境下培养48小时，用灭菌棉签从平板上刮下长出的菌落，悬浮在50%甘油的布氏肉汤保种液中，置于-80°c超低温保存。在-20°c冰箱中保存效果较差，存放一周后细菌复苏率即显著下降。此外，保存菌株需要每隔一年重新活化保存一次。
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