细胞复苏有何注意事项?

细胞复苏是指将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养,细胞恢复生长的过程。那么你知道在细胞复苏过程中有何注意事项吗?让我们一起来看看吧!
1. 取冻存细胞时应做好防护措施,戴好防冻手套,护目镜。如果冻存管密封不严,液氮可被吸入。由于解冻时冻存管中的气温急剧上升,将可能发生爆炸。
2. 细胞放入水浴中复苏时注意用镊子夹住细胞冻存管并在水浴中不时晃动,使其受热均匀,且速度越快越好,这样可以最大限度的保存细胞活力,并防止水浴锅的水进入细胞冻存管造成细胞污染。
3. 打开细胞冻存管之前要用酒精棉球将冻存管消毒并晾干。注意无菌操作,细胞复苏后的操作在4℃冰盒中进行,以减少冷冻保护剂对细胞的毒性。
4. 解冻时间在2min以内完成,且整个过程尽量避免吹打细胞产生气泡,导致细胞复苏后的生长状态不佳。
5. 复苏细胞的时候尽量避免冻存管接缝处沾水,防止支原体污染,实验室定期用过氧化氢熏蒸,细胞小黑点增多时用支原体检测试剂盒检测,并且及时清除。
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