色谱法,又称“色层法”、“层析法”,早诞生于俄国植物学家——茨维特之手,后在此基础上又相继发展出薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法以及纸色谱法。目前,常见的液相色谱仪生产厂家有沃特世、安捷伦、岛津、依利特、上海分析仪器厂、北京分析仪器厂等。
在液相色谱仪开机前,我们首先应当做好准备工作,主要有配置试验要求的流动相、安装试验用的色谱、将流动相过滤脱气三点。流动相的过滤,主要是为了除去流动相中的微粒物质,所应用到的滤膜可分脂溶性滤膜(有机滤膜)、水溶性滤膜与通用型滤膜。
而流动相的脱气,则是为了流动相防止在泵、流路、检测器等仪器组成部分中产生气泡,从而造成泵的不稳定,并增加检测器的噪音。据了解,氦气脱气、真空脱气、超声脱气、加热脱气均可运用于液相色谱仪的流动相脱气。脱气的操作,需要以流动相中的混合物浓度不发生变化为主要原则。
另外,色谱柱的安装调试,还涉及反相色谱柱与正相色谱柱两种。反向色谱柱多以硅胶为基质,常以硅胶健合c18、c8为填料。值得一提的是,液相色谱仪还应当采用稳定性较高的反相色谱柱。因为,这种色谱柱还能够承受酸与碱的作用。同时,因存在着色谱仪遭受腐蚀的可能性,操作人员还应当勤劳更换每次试验用水,不使用卤化物。后,为控制样品在分析过程中的解离,操作人员还需注意反向色谱柱使用时的ph值,过高的ph值会溶解硅胶,过低的ph则会造成烷基的脱落。
除上述几个检测的开机准备工作以外,仪器设备本身的质量、色谱条件、操作人员技术熟练程度、仪器安装环境,都是影响着液相色谱仪发挥作用的关键因素。不仅如此,仪器使用者还应当每三个月,就对液相色谱仪的清洗溶剂过滤器及溶剂瓶进行清洗,以此来保证仪器长时间、率的使用。
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