细胞:nci-h820细胞
中文名称:人乳头状肺腺癌细胞
生长特性:贴壁
培养基:1640培养基 血清:10%fbs(gibco胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% fbs、10% dmso
细胞传代:
1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,pbs缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25%yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。
2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。
3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4):注意培养基ph值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
h9亚型(aiv-h9)核酸扩增检测
实验目的:适用于检测动物体液、咽或泄殖腔试子或肺脏、淋巴结等组织标本以及细胞培养液中病毒h9亚型rna,适用于病毒感染的辅助诊断及流行病学调查,其检测结果仅供参考。
实验原理:选取一对h9亚型(aiv-h9)特异性引物和一条特异性荧光探针, 应用trizol提取rna,经逆转录酶作用将rna转录成cdna,后者在taq酶作用下,配以fq-buffer(内含mg2+、tris-hcl等)、四种核苷酸单体(dntps)等成分,通过一步pcr-荧光探针体外扩增法对病毒h9亚型rna进行扩增,从而达到快速检测之目的。
标本采集:
适用标本类型:发病动物体液、咽或泄殖腔试子或肺脏、淋巴结等组织标本;病毒细胞培养液。
组织:取发病动物肺、肝、脾、肺、肾、淋巴结及胰腺等组织约1g,置入1.5ml洁净ep管,立即送检。
体液及培养液体:取上述标本约1ml,置入1.5ml洁净ep管,立即送检。
咽及泄殖腔等试子:用棉试子取咽或泄殖腔分泌物,将试子放入盛有1.0ml pbs(或生理盐水)的离心管中,立即送检。
标本保存和运输:上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃。但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
关键词:培养箱
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NCI-H820细胞传代培养 人乳头状肺腺癌细胞
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