UACC812细胞人乳腺导管瘤细胞细胞培养操作过程
uacc812细胞人乳腺导管瘤细胞细胞培养操作过程：
注意无菌。无论哪一管液体，开盖后尽量立即关上（如果有几瓶都需要开的，也注意，可以虚盖）。盖子向上放。操作时不要从开盖的容器上方经过。另外，无菌台面上摆放的各种东西，*是一字摆开，平行于自己。尽量不要前后重叠。
uacc812细胞人乳腺导管瘤细胞细胞操作中所用的所有耗材试剂*都是细胞培养。一般都以一次性耗材居多。1ml枪头为加长型培养枪头。移液管亦有10ml一次性无菌移液管
（1）细胞换液：
培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液，加入新培养液。
（2）细胞传代：
传代之前先观察，细胞是否密集，是否开始融合。一般融合达到70－80%就可以传代。早点传代也可以。
如果是贴壁生长的细胞：
1） 培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液；
2） 无菌pbs或无菌生理盐水洗涤3次（按培养体积加入）；
3） 加入适量消化适当时间（一般为0.25%；9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，一次加入1ml。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑，一般如果是细胞株，非原代培养，消化1－2分钟足矣）；
4） 用枪头吹打数十次（视细胞类型而定。一般细胞株30－50次吧，耗时一般2分钟左右）；
5） 加入适量体积培养基终止消化（如果是9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，可以加入1ml培养基；现在培养瓶（皿）里有2ml溶液）。
6） 现在可以将溶液进行分瓶（2ml）。如果是细胞株，直接均分到两个培养瓶（皿）里。如果是原代培养，可以根据消化时间来对细胞进行分离；因此可以将溶液（2ml）都转入新的培养瓶（皿）。
7） 将两个培养瓶（皿）补足培养基到正常体积（果是9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，为5ml培养液）
8） 镜下观察。刚刚传代细胞还没贴壁，悬浮在溶液中，呈圆形。一般2h之内会贴壁，如果已经贴壁，根据细胞类型有不同的形态，但通常都不是圆形。
9） 镜下观察无误之后，再放入细胞培养箱。培养瓶（皿）放入之前，可以用消毒酒精先擦一下。
10） 传代之后，*第二天细胞换液一次。当然，也可以视情况而定。
7、 收拾工作台。物品归位，倒出垃圾。再开紫外照射30min
关键词：细胞培养箱 工作台
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（1）细胞换液：
培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液，加入新培养液。
（2）细胞传代：
传代之前先观察，细胞是否密集，是否开始融合。一般融合达到70－80%就可以传代。早点传代也可以。
如果是贴壁生长的细胞：
1） 培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液；
2） 无菌pbs或无菌生理盐水洗涤3次（按培养体积加入）；
3） 加入适量消化适当时间（一般为0.25%；9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，一次加入1ml。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑，一般如果是细胞株，非原代培养，消化1－2分钟足矣）；
4） 用枪头吹打数十次（视细胞类型而定。一般细胞株30－50次吧，耗时一般2分钟左右）；
5） 加入适量体积培养基终止消化（如果是9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，可以加入1ml培养基；现在培养瓶（皿）里有2ml溶液）。
6） 现在可以将溶液进行分瓶（2ml）。如果是细胞株，直接均分到两个培养瓶（皿）里。如果是原代培养，可以根据消化时间来对细胞进行分离；因此可以将溶液（2ml）都转入新的培养瓶（皿）。
7） 将两个培养瓶（皿）补足培养基到正常体积（果是9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，为5ml培养液）
8） 镜下观察。刚刚传代细胞还没贴壁，悬浮在溶液中，呈圆形。一般2h之内会贴壁，如果已经贴壁，根据细胞类型有不同的形态，但通常都不是圆形。
9） 镜下观察无误之后，再放入细胞培养箱。培养瓶（皿）放入之前，可以用消毒酒精先擦一下。
10） 传代之后，*第二天细胞换液一次。当然，也可以视情况而定。
7、 收拾工作台。物品归位，倒出垃圾。再开紫外照射30min
关键词：细胞培养箱 工作台
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