鱼(鲑鱼)瘦素(LEP)elisa试剂盒操作步骤

鱼(鲑鱼)瘦素(lep)elisa试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟。
大提柱式真菌dnaout
酵母dnaout(见关联产品)
溶壁酶(破壁酶)干粉
蜗牛酶干粉
消解酶(溶细胞酶)干粉
真菌dnaout
柱式真菌dnaout
细胞器dna提取
丝状真菌线粒体dnaout
线状dna清除剂
柱式动物线粒体dnaout,pcr级
柱式动物线粒体dnaout,测序级
柱式昆虫mtdnaout,测序级(停产)
柱式血液mtdnaout,测序级(见关联产品)
柱式植物mtdnaout,测序级(见关联产品)
柱式植物叶绿体dnaout
细菌dna提取
southern级细菌(g+)dnaout(见关联产品)
southern级细菌(g-)dnaout(见关联产品)
百万碱基级细菌(g+)dnaout(见关联产品)
百万碱基级细菌(g-)dnaout(见关联产品)
大提柱式土壤dnaout
大提柱式细菌dnaout
大提柱式细菌dnaout
分枝杆菌dnaout
土壤dnaout
细菌dnaout(250次)
细菌dnaout(50次)

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