增强型黄色荧光蛋白（EYFP）简介
增强型黄色荧光蛋白（eyfp）简介
在绿色荧光蛋白的晶体结构研究中发现203位接近生色团后，对黄色荧光蛋白家族的研究才开始。将203位突变可以稳定生色团在激发状态的偶极矩，这样可以使激发光和发射光的波长均增加20nm。并改造成增强黄色荧光蛋白（eyfp）。eyfp的亮度和发射光谱的有机结合使得这一荧光探针在荧光多色成像中得到很好的应用。eyfp还可以与增强青色荧光蛋白（ecfp）或gfp2一起应用到fret中。然而，黄色荧光蛋白也存在对酸性条件非常敏感，ph6.5时会失去近50%的荧光。eyfp对氯离子非常敏感，光漂白现象比绿色荧光蛋白还严重。
eyfp的产生主要依赖于对野生型gfp的发色团周围微环境的改造。相对于avgfp，最大的突变在于取代了thr203。当荧光蛋白折叠时，tyr203的酚基将会伸入到荧光蛋白内部的空腔，并且与发色团的酚基团在空间上形成了π-π叠加相互作用。这种突变稳定了发色团的激发态偶极矩，从而使得gfp的吸收光谱和发射光谱整体向长波方向平移约20 nm左右。另外gln69向lys的突变增强了发色基的离子化，将发射波长向长波方向进一步移动了1-2 nm。
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