操作步骤&分析程序丨艾美捷丙二醛(MDA)elisa检测试剂盒
丙二醛（mda）是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与tba反应生成红棕色的三甲川（3，5，5-三甲基恶唑-2，4-二-酮），其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中mda时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与tba显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中mda—tba反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加tba与蔗糖或mda显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、mda与tba显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug/g，根据植物样品量和提取液的体积，加入fe3+的终浓度为0.5umol/l。
艾美捷丙二醛(mda)elisa检测试剂盒#ekf60157详细信息：
编号：ekf60157
规格：48t/96t
反应性：鼠
范围：7.813-500ng/ml
灵敏度：4.688ng/ml
应用：用于血清、血浆、组织匀浆和其他生物液中mda的定量检测。
储存：2-8°c，保存6个月
有效期：见试剂盒标签
注：仅供研究使用。
丙二醛(mda)elisa检测试剂盒操作步骤：
步骤1：在预涂板上分别设置标准、试样、对照（空白）孔，然后记录它们的位置。
第2步：在每个孔中加入50ul标准品或样品。立即向每个孔中加入50ul生物素标记的抗体，轻轻敲击
平板以确保充分混合，然后在37°c下孵育45分钟。
清洗步骤：抽吸并清洗盘子3次。
步骤3：向每个孔中加入100ul sabc工作溶液，并在37°c下孵育30分钟。
清洗步骤：抽吸并清洗盘子5次。
第4步：添加90ul tmb基质溶液。在37°c下培养10-20分钟。
步骤5：添加50ul停止溶液。在450nm下立即读取并计算
分析程序：
稀释样品和试剂时，必须将它们完-全、均匀地混合。在向井中加入tmb之前，平衡tmb
基板在37°c下放置30分钟。建议为每次测试绘制一条标准曲线。
1.在预涂板上分别设置标准、试样、对照（空白）孔，然后记录其位置。它是建议测量每个标准品和样品一式两份。
2.添加样品和生物素标记的抗体：每孔添加50ul标准、空白或样品。空白井添加样品/标准稀释缓冲液。立即向每个孔中加入50ul生物素标记的抗体工作溶液。封面为我们提供的封板机。轻轻拍打盘子，确保充分混合。在37°c下培养45分钟。（解决方案添加到微孔板的底部，尽可能避免内壁接触和起泡。）
3.洗涤：取下盖子，用洗涤缓冲液洗涤板3次，并让洗涤缓冲液在孔中停留1分钟每次。最后一次洗涤后，通过抽吸或滗析去除任何剩余的洗涤缓冲液。
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步骤1：在预涂板上分别设置标准、试样、对照（空白）孔，然后记录它们的位置。
第2步：在每个孔中加入50ul标准品或样品。立即向每个孔中加入50ul生物素标记的抗体，轻轻敲击
平板以确保充分混合，然后在37°c下孵育45分钟。
清洗步骤：抽吸并清洗盘子3次。
步骤3：向每个孔中加入100ul sabc工作溶液，并在37°c下孵育30分钟。
清洗步骤：抽吸并清洗盘子5次。
第4步：添加90ul tmb基质溶液。在37°c下培养10-20分钟。
步骤5：添加50ul停止溶液。在450nm下立即读取并计算
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稀释样品和试剂时，必须将它们完-全、均匀地混合。在向井中加入tmb之前，平衡tmb
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1.在预涂板上分别设置标准、试样、对照（空白）孔，然后记录其位置。它是建议测量每个标准品和样品一式两份。
2.添加样品和生物素标记的抗体：每孔添加50ul标准、空白或样品。空白井添加样品/标准稀释缓冲液。立即向每个孔中加入50ul生物素标记的抗体工作溶液。封面为我们提供的封板机。轻轻拍打盘子，确保充分混合。在37°c下培养45分钟。（解决方案添加到微孔板的底部，尽可能避免内壁接触和起泡。）
3.洗涤：取下盖子，用洗涤缓冲液洗涤板3次，并让洗涤缓冲液在孔中停留1分钟每次。最后一次洗涤后，通过抽吸或滗析去除任何剩余的洗涤缓冲液。
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