兔附红细胞体探针法荧光定量PCR试剂盒实验原则
兔附红细胞体（兔嗜血支原体）探针法荧光定量pcr试剂盒实验原则：
1， 先选择好探针，然后设计引物使其尽可能的靠近于探针。
2， 扩增子的长度应不超过400bp，理想的*能在100-150bp内，扩增片断约短，有效的扩增反应就越容易获得。较短的扩增片断也容易保证分析的一致性
3， 保持gc含量在20%和80%之间，gc富含区容易产生非特异反应，从而会导致扩增效率的降低，及在sg分析中非特异信号。
4， 为了保证效率和重复性，应避免重复的核苷酸序列，尤其是g(不能有4个连续的g)
5， 将引物和探针互相进行配对检测，以避免二聚体和发卡结构的形成。
b)，探针设计指导
1，在设计引物之前设计探针
2，探针的tm值应在68-70℃之间，如果是目测探针，则要仔细审查gc富含区。
3，探针的5’端要避免有*，5’g会有淬灭作用，即使被切割下来这种淬灭作用也还会存在
4，选择c多于g的链作探针，g的含量多于c会降低反应效率，这时就应选择配对的另一条链作为探针。
6， 探针应尽可能的短，不要超过30个bp。
7， 检测探针的dna折叠和二级结构。
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