spe是近二十年来得到快速发展应用的理化检测样品前处理方法之一,我们将传统spe填料设计成拥有永磁性的分撒萃取试剂,并结合自动化设备的研发和应用,形成磁性萃取方法和系统(mspe)。
autom32全自动萃取
mspe极大地提高了实验室生产力,有效节约人力成本,并显著降低人为因素在前处理中的影响。
本文选取了治疗癫痫的五种常用精神类药物(下表),建立mspe样品处理方法,并对其进行了基本的方法学验证。
名称
缩写
lev
ltg
代谢物
mhd
妥
phb
tpm
仪器和材料
磁性固相萃取剂:hlb
全自动提取仪:autom32
lc-ms/ms:sciex4500
hlb磁性萃取填料
样品处理
取200 μl血浆,加入400μl去离子水,混匀备用。在1#孔位放入2mghlb磁性固相萃取剂。按右表所示,移取溶剂和样品液于autom32专用96孔板的对应孔位,并设定方法。点击开始运行mspe。
孔位
步骤
溶液
体积(μl)
振荡(s)
静置(s)
1
活化
甲醇
200
30
30
2
平衡
水
600
30
30
3
上样
样品液
600
30
30
4
淋洗
水
200
30
30
5
洗脱
乙腈
1000
30
30
2
排废
自动运行完成后,移取5#列孔位的样品洗脱液,置于1.5 ml玻璃样品瓶内,进样lc-ms/ms。
数据与讨论
下表为五种抗癫痫药物的标准曲线(ng/ml)及其准确度(%)。
actual conc.
cal. conc.
accuracy
l1
100
100.8
100.8
l2
200
199.8
99.9
l3
500
497.2
99.4
l4
1000
900.6
90.1
l5
2000
2073.7
103.7
l6
4000
4243.9
106.1
actual conc.
cal. conc.
accuracy
l1
/
/
/
l2
0.2
0.17
84.6
l3
0.5
0.51
108.2
l4
1
0.93
93.1
l5
2
2.05
102.5
l6
4
3.94
98.6
代谢物
actual conc.
cal. conc.
accuracy
l1
50
51.8
103.5
l2
100
93.3
93.3
l3
250
250.5
100.2
l4
500
475.7
95.1
l5
1000
1030.9
103.1
l6
2000
2095.0
104.7
妥
actual conc.
cal. conc.
accuracy
l1
100
94.2
94.2
l2
200
221.7
110.9
l3
400
419.4
104.8
l4
1000
1000.7
100.1
l5
2000
1548.9
87.4
l6
4000
4504.9
112.6
actual conc.
cal. conc.
accuracy
l1
100
106.4
106.4
l2
200
171.3
85.7
l3
400
411.0
102.7
l4
1000
1028.2
102.8
l5
2000
1775.7
88.8
l6
4000
4542.5
113.6
血浆样品添加4000ng/ml五种药物,同上述步骤,使用autom32做样品自动处理。如下表,回收率在87.1~129%。
lev
ltg
mh
phb
tmp
回收率(%)
87.1
117
116
96.3
129
rsd(%)
n=2
0.02
15
19
2.4
9.0
结果和讨论
使用hlb聚合物磁性萃取剂,结合autom32萃取仪,可在20分钟内运行一批次32个样本的全自动固相萃取样品处理。期间,无需人为干预,无需正压或负压驱动的液流操作。一键点击开始运行直至处理完成,洗脱液直接上机lc-ms/ms分析。mspe作为一种全新的自动化样品前处理手段,线性良好,结果准确精密,达到了定量分析的基本方法学要求。
参考信息
点击.cn/prolist_t53.html获取产品信息,或致电联系普敦实验室设备(上海)有限公司。
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