根据对采血时间不同,牛血清可分为胎牛血清、新生牛血清、小牛血清三种。胎牛血清(fetal bovine serum)是在母牛怀孕5-8个月时,通过胎牛心脏穿刺采血获取的血清。新生牛血清(newborn calf serum)是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。小牛血清(calf serum)采自出生后2周至1年内的小牛静脉取血。
血清促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。
某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃。解冻血清时,*我们总结出来的三步法(见下表),可预防沉淀发生。不*血清4℃过夜融化,更不能直接将冷冻的血清放入37℃水浴或者温箱中。因为血清在融化时,蛋白先融,冰块后融,局部蛋白浓度过高,易发生沉淀。血清在解冻后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。
温度 100ml血清500ml血清
一步 室温 35分钟 90分钟
或15-20℃水浴 5分钟 18分钟
第二步 20℃水浴15分钟 25分钟
第三步 37℃水浴20分钟 35分钟
注意:在水浴过程中,血清的液面要*浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动,使血清混匀,但不要产生泡沫!
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