比色法是通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法,其是基于溶液对光的选择性吸收而建立起来的。比色法的原理是根据被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色,颜色深度和物质含量成正比,则根据光被有色溶液吸收的强度,即可测定溶液中物质的含量。
比色分析具有简单、快速、灵敏度高等特点,可测定微量组分。目前,比色分析已成为工农业生产、医药卫生、环境保护和科学实验等方面的重要方法,几乎可对所有的无机离子和许多有机化合物进行直接或间接测定。
比色法常用的方法包括 目视比色法、光电比色法法,其也是多个土壤检测标准的标准检测方法。如ny/t 1121.8-2006《土壤检测 第8部分:土壤有效硼的测定》、ny/t 1121.7-2006《土壤检测 第7部分:酸性土壤有效磷的测定》、ny/t 1849-2010《酸性土壤铵态氮、有效磷、速效钾的测定联合浸提-比色法》等等。
第三次全国土壤普查工作正在紧锣密鼓地开展,比色法成为土壤检测中的“主力军”。土壤检测中,比色法具体应用如下:
土壤有效硼的测定
依据ny/t 1121.8-2006《土壤检测 第8部分:土壤有效硼的测定》。土壤中有效硼采用沸水提取,提取液用edta消除铁、铝离子的干扰,用高锰酸钾消褪有机质的颜色后,在弱酸性条件,以甲亚胺-h 比色法测定提取液中的硼量。
值得注意的是,加甲亚胺试剂时必须尽量准确,因试剂本身颜色较深,影响吸光值。每批样品标准系列必须重新测定。
土壤有效磷的测定
依据ny/t 1121.7-2006《土壤检测 第7部分:酸性土壤有效磷的测定》。酸性土壤中的磷主要以fe-p和al-p形态存在,利用f-具有在酸性条件下溶解络合fe3+和al3+的能力,使-定量具潜在活性的磷酸铁磷酸铝中的磷释放出来。同时由于h+的作用亦溶解出部分活性较大的ca-p中的磷。本方法严格规定土液比为1:10,浸提温度为20℃ ~25℃ ,振荡提取时间为30 min。所提取出的有效磷以钼锑抗比色法测定。
该种方法所规定的酸度及钼酸铵浓度下,钼锑抗法显色温度以20c ~ 40c为宜,如室温低于20c,可放置在30仁~ 40c烘箱中保温30 min,取出冷却后比色。
土壤铵态氮、有效磷、速效钾的测定
依据ny/t 1849-2010《酸性土壤铵态氮、有效磷、速效钾的测定联合浸提-比色法》。联合浸提剂中的na+可以与土壤胶体表面的nh4+和k+进行交换,连同水溶性离子一起进入溶液。酸性土壤中的磷主要以fe-p和al- p形态存在,利用f在酸性溶液中络合fe3+和al3+的能力,使一定量的比较活性的磷酸铁、磷酸铝中的磷释放出来,同时由于h+的作用亦溶解出部分活性较大的ca- p中的磷。
浸出液中的铵离子与纳氏试剂反应生成黄色物质,在一定浓度范围内,其颜色深浅与溶液中铵态氮含量成正比,在420nm波长下测定。浸出液中的磷酸盐与酸化的钼酸铵溶液生成磷钼杂多酸,遇氯化亚锡被还原成-种深蓝色络合物磷钼蓝,其颜色深浅与磷含量成正比,在685nm波长下测定。浸出液中的钾离子与四苯硼钠作用,生成稳定的四苯硼钾沉淀,使溶液变混浊,在一定浓度范围内,浊度与溶液中钾含量成正比,在685nm波长下测定。
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