兔子催乳素(prl)elisa试剂盒采用双抗体夹心elisa法。预先包被的抗体为催乳素(prl/lth)单克隆抗体,检测相抗体为多克隆抗体,经标记。样品和标记抗体先后加入酶标板孔反应后,经pbs或tbs洗涤,随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过pbs或tbs的洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
使用兔子催乳素(prl)elisa试剂盒前要做好这些准备工作:
1、请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温后方可进行试验;
2、将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回。
3、标准品:加入标准品稀释液1.0ml至冻干标准品中,静置10分钟,待其充分溶解后,轻轻混匀,之后在管身标注①,然后根据需要进行稀释注意:务必要保证冻干标准品溶解和混匀。
4、标准品稀释方法:取7支洁净的试剂管,分别标注②,③,④,⑤,⑥,⑦,⑧.每管加入300μl标准品稀释液。从第①管内取出300μl加入到第②管,混匀后,再从第②管取出300μl加入到第③管,以此类推至第⑦管。第⑧管为标准品稀释液,作为阴性对照使用。
5、抗体工作液:按当次试验所需用量,用抗体稀释液稀释浓缩化抗体(1:100),配置成化抗体工作液。使用前30分钟准备,仅供当日使用。
6、酶结合物工作液:按当次试验所需要用量,用酶结合物稀释液稀释浓缩酶结合物(1:100),配置成酶结合物工作液。使用前30分钟准备,仅供当日使用。
7、tmb显色工作液:在使用兔子催乳素(prl)elisa试剂盒使用之前30分钟,按tmb显色液ax9份加tmb显色液bx1份(9:1)的比例配制tmb显色工作液。
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