小鼠脑肠肽elisa检测试剂盒样本实验前准备
小鼠脑肠肽elisa检测试剂盒样本实验前准备：
elisa试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择edta、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用pbs（ph7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的pbs，ph7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的pbs（ph7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
结果计算与判断
1. 所有od值都应减除空白值后再行计算。
2. 以标准品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0 ng/ml为横坐标，od值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。
3. 根据样品od值在该曲线图上查出相应ama含量，再乘上稀释倍数即可。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的ama 检测浓度小于4ng/ml。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的小鼠ama。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。
3. 重复性：板内、板见变异系数均小于11％。
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elisa试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择edta、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用pbs（ph7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的pbs，ph7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的pbs（ph7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
结果计算与判断
1. 所有od值都应减除空白值后再行计算。
2. 以标准品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0 ng/ml为横坐标，od值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。
3. 根据样品od值在该曲线图上查出相应ama含量，再乘上稀释倍数即可。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的ama 检测浓度小于4ng/ml。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的小鼠ama。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。
3. 重复性：板内、板见变异系数均小于11％。
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