食品安全正在行动 | 安捷伦亚硝胺分析为食品守护健康安全
n- 二甲基亚硝胺（ndma）是 n- 亚硝胺类化合物中的一种，具有肝毒性和致癌性，是国际公认的毒性较大的污染物。ndma 广泛存在于各种腌制、熏烤肉制品和热加工食品中，长期食用此类食品会对健康产生潜在危害。因此，我国《食品安全国家标准 食品中污染物限量》(gb 2762-2022) 对 n- 二甲基亚硝胺的含量限值有相应的规定，并于近期发布了《gb 5009.26-2023 食品安全国家标准食品中 n- 亚硝胺类化合物的测定》。此次标准的更新加入了第二法 quechers- 气相色谱-质谱/质谱法，为实现大批量快速高灵敏度检测提供了新的解决方案。此次更新中在样品净化部分指明可使用安捷伦 emr-lipid 增强型脂肪去除产品，同时前期方法开发也使用了安捷伦 hp-innowax 色谱柱。
针对此次标准更新，安捷伦推出了对应解决方案。采用 bond elut emr-lipid 增强型脂质去除产品进行前处理，使用 7000d 三重四极杆气质联用系统进行样品分析，有效解决传统的水蒸气蒸馏法大量溶剂的使用，缩短 60% 的前处理时间，同时避免易乳化和过度蒸发的问题，且灵敏度和回收率高，适用于分析食品中 n- 亚硝胺类化合物。
具体方案
仪器和设备
仪器
agilent 9000 气相色谱系统和 7000d 三重四极杆气质联用系统，配备多模式进样口（mmi）和 agilent 7693a 自动液体进样器。
样品前处理材料
agilent bond elut emr-lipid dspe 增强型脂质去除净化管（部件号 5982-1010）和 agilent bond elut emr-lipid polish 反萃管（部件号 5982-0101）。
注：含水分的湿样品需用到萃取盐包，部件号 5982-5550ch，前处理流程参考标准 gb 5009.26-2023。
样品前处理流程：
采用 bond elut emr-lipid 样品，前处理流程简单，每个样品取样量低（10 g），适用于分析价值高、难以大量取样的食品样品。整个流程简单、易操作，每个样品只需消耗 10 ml 乙腈，且其中不含溶剂浓缩过程，1 小时内可以处理约 6 个样品。
图 1. 样品前处理流程
气相色谱条件
色谱柱：agilent hp-innowax 毛细管柱，30 m x 0.25 mm, 0.25 μm（部件号 19091n-133i）
进样口衬管：单锥形不分流超高惰性衬管，带玻璃毛（部件号5190-2293）
进样体积：5.0 μl
载气：氦气，恒定流速，1.0 ml/min
进样口温度：程序升温，初始温度 60 ℃，保持 0.16 min，以 900 ℃ /min 的速率升至 220 ℃
进样方式：大体积进样（溶剂放空模式）；其进样速率：32 μl/min
放空流量：90 ml/min ；放空压力：5 psi ；放空时间：0.16 min
升温程序：40 ℃ 下保持 0.5 min，以 15 ℃ /min 的速率升至 190 ℃，再以 40 ℃ /min 的速率升至 250 ℃，保持 3 min
实际样品加标测试结果
本应用简报以蚝豉样品为例，对蚝豉样品进行三个不同浓度的加标：1.0 μg/kg、4.0 μg/kg 和 10 μg/kg，每个浓度下平行处理三份样品。图 2 显示了加标浓度为 1.0 μg/kg 的九种 n- 亚硝胺化合物的 mrm 谱图。从中可以看出，各种目标化合物的峰形对称且不受干扰。表 1 列出了不同浓度下的加标回收率与平行样品的 rsd%，回收率范围为 81%–117%，rsd 小于 14%，表明该方法具有良好的准确度和精密度。
图 2. 蚝豉样品中加标浓度为 1.0 μg/kg 的各种化合物的 mrm 谱图
表 1. 蚝豉样品在不同浓度下的加标回收率平均值与相对标准偏差 (rsd) (n = 3)
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注：含水分的湿样品需用到萃取盐包，部件号 5982-5550ch，前处理流程参考标准 gb 5009.26-2023。
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采用 bond elut emr-lipid 样品，前处理流程简单，每个样品取样量低（10 g），适用于分析价值高、难以大量取样的食品样品。整个流程简单、易操作，每个样品只需消耗 10 ml 乙腈，且其中不含溶剂浓缩过程，1 小时内可以处理约 6 个样品。
图 1. 样品前处理流程
气相色谱条件
色谱柱：agilent hp-innowax 毛细管柱，30 m x 0.25 mm, 0.25 μm（部件号 19091n-133i）
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进样方式：大体积进样（溶剂放空模式）；其进样速率：32 μl/min
放空流量：90 ml/min ；放空压力：5 psi ；放空时间：0.16 min
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图 2. 蚝豉样品中加标浓度为 1.0 μg/kg 的各种化合物的 mrm 谱图
表 1. 蚝豉样品在不同浓度下的加标回收率平均值与相对标准偏差 (rsd) (n = 3)
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