犬尿氨酸（Kynurenine）ELISA检测试剂盒使用说明书
犬尿氨酸（kynurenine）
elisa检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被犬尿氨酸（kynurenine）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的犬尿氨酸（kynurenine）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（od 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的s0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
12孔×8条
12孔×4条
无
标准品
0.3ml*6管
0.3ml*6管
无
样本稀释液
6ml
3ml
无
检测抗体-hrp
10ml
5ml
无
20×洗涤缓冲液
25ml
15ml
按说明书进行稀释
底物a
6ml
3ml
无
底物b
6ml
3ml
无
终止液
6ml
3ml
无
封板膜
2张
2张
无
说明书
1份
1份
无
自封袋
1个
1个
无
注：标准品（s0-s5）浓度依次为：0、30、60、120、240、480 pg/ml
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μl，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3.样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
结果判断
绘制标准曲线：在excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应od值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数r值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最di检测浓度小于1.0 pg/ml。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月
从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验技术及论文润色服务，协助客户各类实验服务及论文润色十余年，是您值得信赖的科研合作伙伴!
如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究，欢迎您与我们联系。
实验技术服务：
elisa试剂盒免费代检测
cck8检测
he染色
pas糖原染色
western blot
免疫组化ihc染色
荧光定量pcr
阿利新蓝染色
流式细胞检测
免疫荧光染色
激光共聚焦
动物模型服务
石蜡/冰冻切片
透射电镜服务
扫描电镜实验
蛋白双向(2-d)
蛋白双向2d-wb
免疫共沉淀
原位杂交（fish）
蛋白质纯化
探针合成
dna甲基化实验
琼脂糖凝胶电泳
药理毒理动物实验
番红o固绿染色
明胶酶谱mmp
酶活性检测
动物造模/模型实验服务
进口零食批发进货渠道,进口零食批发进货渠道经验
精密光学平台振动隔离技术-安合盟光学平台
简单概述耐腐蚀化工泵
美国海运专线运输是否值得选择,美国海运专线收费标准
大蒜去皮生产线加工设备及流程介绍
犬尿氨酸（Kynurenine）ELISA检测试剂盒使用说明书
eBay卖家没有合并运费，买家怎么去申请
亚马逊测品到底选FBA好还是FBM好呢？
乳化机工作后需要出料方式有哪两种
顶装式翻板液位计工作原理
揭晓恒温恒湿箱的计量方法
玉米加工设备工艺流程合理化的重要性
fba4diroid
无机包裹型复混肥料（复合肥料）-水分的测定
常用数控铣刀7种表现形式，你知道吗？
受改道影响，国际海运港口不得不为延误做好准备（货主货代请注意）
深圳有哪些知名的物流公司
一文详解国际海运的到付和预付！
欧洲8大站点夏末促销暨返校季活动提报开启
深圳fba头程物流，美国fba头程物流
elisa检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被犬尿氨酸（kynurenine）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的犬尿氨酸（kynurenine）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（od 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的s0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
12孔×8条
12孔×4条
无
标准品
0.3ml*6管
0.3ml*6管
无
样本稀释液
6ml
3ml
无
检测抗体-hrp
10ml
5ml
无
20×洗涤缓冲液
25ml
15ml
按说明书进行稀释
底物a
6ml
3ml
无
底物b
6ml
3ml
无
终止液
6ml
3ml
无
封板膜
2张
2张
无
说明书
1份
1份
无
自封袋
1个
1个
无
注：标准品（s0-s5）浓度依次为：0、30、60、120、240、480 pg/ml
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μl，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3.样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
结果判断
绘制标准曲线：在excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应od值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数r值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最di检测浓度小于1.0 pg/ml。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月
从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验技术及论文润色服务，协助客户各类实验服务及论文润色十余年，是您值得信赖的科研合作伙伴!
如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究，欢迎您与我们联系。
实验技术服务：
elisa试剂盒免费代检测
cck8检测
he染色
pas糖原染色
western blot
免疫组化ihc染色
荧光定量pcr
阿利新蓝染色
流式细胞检测
免疫荧光染色
激光共聚焦
动物模型服务
石蜡/冰冻切片
透射电镜服务
扫描电镜实验
蛋白双向(2-d)
蛋白双向2d-wb
免疫共沉淀
原位杂交（fish）
蛋白质纯化
探针合成
dna甲基化实验
琼脂糖凝胶电泳
药理毒理动物实验
番红o固绿染色
明胶酶谱mmp
酶活性检测
动物造模/模型实验服务
进口零食批发进货渠道,进口零食批发进货渠道经验
精密光学平台振动隔离技术-安合盟光学平台
简单概述耐腐蚀化工泵
美国海运专线运输是否值得选择,美国海运专线收费标准
大蒜去皮生产线加工设备及流程介绍
犬尿氨酸（Kynurenine）ELISA检测试剂盒使用说明书
eBay卖家没有合并运费，买家怎么去申请
亚马逊测品到底选FBA好还是FBM好呢？
乳化机工作后需要出料方式有哪两种
顶装式翻板液位计工作原理
揭晓恒温恒湿箱的计量方法
玉米加工设备工艺流程合理化的重要性
fba4diroid
无机包裹型复混肥料（复合肥料）-水分的测定
常用数控铣刀7种表现形式，你知道吗？
受改道影响，国际海运港口不得不为延误做好准备（货主货代请注意）
深圳有哪些知名的物流公司
一文详解国际海运的到付和预付！
欧洲8大站点夏末促销暨返校季活动提报开启
深圳fba头程物流，美国fba头程物流