细胞转染实验一般过程步骤

转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。细胞转染是指将外源分子如dna,rna等导入真核细胞的技术。应用在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中。
细胞转染实验一般过程步骤:
1.转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。
2.选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体 体积:dna质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的myod或者egfp的dna,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。
3.将混合液在室温放置10―15分钟。
4.吸去培养板中的培养基,用pbs或者无血清培养基清洗一次。
5.加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6.到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入*培养基继续培养24-48小时。
关键词:培养箱

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